Файл: отчет по учебной общепрофессиональной практике (микробиология).docx

Bacillus anthmcis (лат.) (сибиреязвенная палочка) вид грамположительных спорообразующих бактерий. Возбудитель сибирской язвы- Первый доказанный возбудитель заболеваний человека, выделен в чистую культуру Р. Кохом в 1877 году

В anthracis является возбудителем сибирской язвы, отнесён ко П группе патогенности В факторы патогенности входят:

Образование капсулы, обладающей антифагоцитарной активностью и адгезивными свойствами;
Образование термолабильного трехкомпонентного экзотоксина, состоящего из трёх компонентов — эдематозного компонента (вызываег воспаления, отеки), защитного протективного антигена (не обладает токсичностью) и легального компонента.

Механизм передачи возбудителя контактный от падшего и больного скота, заражённой спорами бактерии, находящимися в почве.

Образование спор вне живого организма.

Бактерия Bacillus anthmcis может сохраняться в форме спор, никак не проявляя себя, прак-мчески до бесконечности — до момента вдыхания, проглатывания или соприкосновения с открытой раной, после чего она активизируется и вызовет смертельно опасную сибирскую язву[5]

СИБИРСКАЯ ЯЗВА, острая инфекц- болезнь из группы зооанлропонозов, протекающая в кожной (с образованием карбункула и язвы) или генерализованной форме — в зависимости от места внедрения возбудителя. Название болезни приписывают рос врачу С. С Андреевскому (17601818), который описал её в 1796 после экспедиции в Зауралье (1786—1789). Болезнь вызывается сибиреязвенной палочкой (Bacillus anthracis), которая образует высокоустойчивые споры, сохраняющиеся в окружающей среде в течение многих лет. Источник возбудителя — больные с.-х. жиВОТНЫе, заражение происходит при контакте с ними, их шкурами, шерстью, объектами окружающей их среды, содержащими споры, при употреблении молока, мяса. При кожной форме болезни в месте внедрения возбудителя образуется язва, покрытая чёрной коркой, возникают безболезненный отек, гипертермия течение доброкачественное. При попадании возбудителя через дыхательные пути или пищеварит. тракт развивается генерализов. септическая форма С. я., которая обычно заканчивается смертью в течеш,те нескольких дней. Лечение: антибиотики, сибиреязвенная вакцина и др. Профилактика• соблюдение санитарных правил при работе со скотом и животноводч. сырьём; вакцинация; выявление, забой и захоронение по спец. правилам трупов больных

ЖИВОТНЫХ.

Сибирская язва у животных

Сибирская язва у лапотных протекаег с тяжёлой интоксикацией, лихорадкой, септицемией, карбункулами, поражением миндалин, легких и кишечника. Болеют все виды с.-х. и мн. виды диких животных Возбудитель передаејся через обсемененные бациллами объекты внешней среды. Источник возбудителя — больные животные, выделяющие бациллы с молоком, слюной, калом во внешнюю среду. Заражение алиментарным, трансмиссивным и респираторным путями, Течение болезни молниеносное, острое подострое и хроническое. Диагноз — по эпизоотологич. и клинич. признакам, а также результатам лабораторных исследований Лечение: специфич. гипериммунная сыворотка. Профилактика: поголовная ежегодная вакцинация животных в ранее неблагопоЛучных пунктах; изоляция больных и подозрительных по заболеванию, Вш<ЦИНЩИЯ ОСтЛЬНЫХ ЖИВОТных. Труты сжигают, помещения и территорию дезинфицируют, в хозяйстве объявляют карантин

Морфология

Bacrllus anthmcis ( сибирская язва у— крупная неподвижная палочка -2 мкм) с закруглёнными концами При образовании цепочек концы клеток выглядят обрезанными под прямым углом. Олсутствие подвижности — абсолютный дифференцирующий признак сибиреязвенной палочки, отличающий её от других бацилл В клиническом материале бактерии располагаются парами или в виде коротких цепочек

На питательных средах возбудшель сибирской язвы образуют более длинные цепочки; при этом морфология палочек несколько изменяется — они слегка утолщены на концах и образуют сочленения, напоминающие «бамбуковую трость». Эги морфологические изменения ещё более явно проявляются при температурной фиксации при окрашивании По Граму сибиреязвенная палочка окрашивается ПОЛОЖИТЕЛЬНО; тюке хорошо воспринимает различные анилиновые красшели Для защиты от действия факторов резистентности возбудитель сибирской язвы образует капсулы, наблюдаемые только у бактерий, выделенных из организмов животных или человека, либо на средах, содержащих наливную сыворотку Другой характерный признак возбудителя сибирской язвы — высокая чувствительность сибиреязвенной ПШТОЧКИ к пенициллину Обработка культур сибирской язвы приводит к разрушению клеточных стенок и образованию цепочек, состоящих из протопластов, напоминающих «жемчужное ожерелье».

На плотных средах, в зависимости от характеристик штам-мщ мотуг формироваться колонии R-, S- и М-формьг, клетки бактерий мнут быть капсулированы или нет, в культуршљной жидкости может присутствовать или отсутствовать экзотоксин, культуры могут быть патогенны-ми или непатогенными для животных Согласно Dong Shulin штаммы по этим критериям подразделяются на четыре типа.

1-й тип Вирулентный штамм Колонии М-формы, есть капсула, токсин (культуральный фильтрат при внутрикожном введении кроликам или морс-югм свинкам вызывает образование отека) выявляется в РДП, культура патогенна для животных. Такие свойства обусловлены наличием плазмид рх01 и рх02.

2-й тип Вакцинный штамм Колонии №формы, капсулы нет, токсин есть, культура не патогенна для животных Имеется плазмида рх01.

3-й тип. Авирулентный Колонии М-формы, есть капсула, токси-на нет, кульлура патогенна для животных. Присутствует плазмида рх02

4-й тип. Непатогенный штамм. Колонии капсулы и токсина нет, культура не патогенна для животных. Плазмиды отсутствуют.

Тинкториальные свойства

Из подозрительных колоний, бульонных культур, систем для диск-преципшации (при наличии преципитации) делают мазки и окрашивают по Граму люминесцирующими сыворотками

В бульонной культуре и колониях ютетют возбудителя образуог более длинные цепочки, чем в

ЖИВОТНЫХ тканях. Палочки при ЭТОМ слегка утолщены на концах («бамбуковая ярость»). Возбудитель на обычнььх шпательных средах капсулу не формирует, но она есть у меток культур, выращенных на средах Томова и Буза. В мазках из бульонной культуры с диффузным ростом в основном находят отдельно или парно расположенные клетки, редко — короткие цепочкуг Результаты люминесцентной микроскопии имеют ориентировочное значение.

При обнаружении в окрашенных препаратах бактерий с характерными мя В.

anjhracis морфологическими и тинкториальными свойствами культуры отвивают на МПА МПБ, можно на систему для диск-преципитации с целью дальнейшего изучения Смешанные культуры дробно рассевают на МПА в чашках Петри или заражают белых мышей для получения ЧИСТОЙ культуры возбудителя

В. cmtlracrs обкхвует споры в питательных средах, бедных белковым азотом, углеводами; быстрее на мОтНЫХ, чем жидких средах При 370 С уже через 30-40 часов отмечается интенсивное спорообразование, при 18-200 С —- через 48-72 часа. Споры овальной формы, сильно преломляют свет, размеры 0,8-1,0х1-1,5 мкм.

Методы культивирования и идентификации Культивирование

B aclllus anthracis по способу дыхания относят к факультативным анаэробам, хорошо растет на универсальных средах (МПБ, МПА, МТГЖ, картофеле, молоке). Оптимальная температура роста на МПА 35-ЗТС, в бульоне 32-33⁰С. При температуре ниже 12 и выше 4-5⁰С не растет Оптимум РН сред 7,27,6. На поверхности МПА в аэробных условиях при температуре ЗТС 17-24-часовые культуры состоят из серовато-беловатьгх тонкозернистых с серебристым опенком, похожих на снежинки колоний, имеющих шероховатый рельеф и характерных для ТИПИЧНЫХ вирулентных штаммов В-форма). Диаметр колоний не превышает 3-5 мм.На сывороточном агаре и свернутой лошадиной сыворотке в присутствии 10-50⁰/0 углекислоты колонии гладкие полупрозрачные (&форма), а также слизистые (мукоиднъте), тянущиеся за петлей (М-форма), состоящие из капсульных палочек.В МПБ Bacillus anthracjs через 16-24 ч на дне пробирки образует РЫХЛЫЙ белый осадок, надосадочная жидкость остается прозрачной, при вслряхивании бульон не мутнеет, осадок разбивается на мелкие хлопья В-форма).При посеве в столбик желатина на 25-е сут появляется желтовато-белый стержень. Культура напоштнаег елочку, перевернутую верхушкой вниз. Постепенно верхний слой желатин начинает разжижаться, принимая сначала форму воронки, затем мешочка.Васч//и.ч anfhracts при росте в молоке вырабатываег ослоту и через 24 дня свертывает его и пептонизирует сгустокВозбудитељ хорошо размножается в 8-12-суточных куриных эмбрионах, вызывая их гибель на

24 дней с момента заражения

Цдешмфикация

Расхождения между стандартной микробиологической идентификацией и результатами LRNПЦР наблюдались для 23 изолятов, которые были извлечены после длительного хранения. MLVA и MLST были выполнены, чтобы помочь в устранении расхождений и идентификации этих изолятов. Для шести УСТОЙЧИВЫХ к тмма-фагам ГЩР-положшрльных изолятов все шесть хромосомных локусов MLVA были успешно амплифигщрованы, что подтверждаег идентификацию этих изолятов км устойчивых к гамма-фамм В. anthracis. Помимо устойчивости к рамма-фагам, эти изолягы бьџти типичными В. anthracis. Эм изоляты имели типичную морфологию колоний, были негемолитическими, чувствительными к пенициллину и кластеризовались с В. anthracrs с помощью MLST. Все мегоды, использованные в лом исследовании, убедительно подтверждают их идентификацию как В. anthraus- Устойчивые к гамма-фагам В anthmcis, хотя и встречаются редко, ранее были задокументированы [15]