ВУЗ: Не указан
Категория: Не указан
Дисциплина: Не указана
Добавлен: 27.04.2024
Просмотров: 61
Скачиваний: 0
ВНИМАНИЕ! Если данный файл нарушает Ваши авторские права, то обязательно сообщите нам.
1. Размер и однородность частиц сорбента;
2. Длину колонки;
3. Скорость газа-носителя;
4. Температуру колонки;
5. Объем вводимой пробы.
1. Увеличение диаметра зерен приводит к увеличению размывания пика. Поэтому следует работать с сорбентом, имеющим минимальную крупность и максимальную однородность по крупности. Чаще всего используют фракции носителя с диаметром зерен 0,15-0,20 и 0,20-0,30 мм.
2. С увеличением длины колонок улучшается разделение. Так, увеличивая длину колонки с 1 м до 4м. можно увеличить критерий разделения в два раза, увеличение же длины от 3 до 4м дает весьма малый выигрыш в разделении. Предел удлинения колонки достигается очень быстро. При использовании носителя с зернением 0,15-0,20 мм колонки длиной выше 5 м при оптимальной скорости газа-носителя имеют на выходе давление 2,5-3,5·105 Па, что препятствует вводу пробы шприцем.
3. Значительное уменьшение скорости газа-носителя может привести к снижению критерия разделения, а увеличение скорости лишь немного уменьшает его значение.
4. Температуру анализа следует подбирать экспериментально; увеличение ее приводит к уменьшению допустимого объема пробы и, соответственно, ширины пика на хроматограмме.
5. Размер введенной пробы должен отвечать двум требованиям, противоречащим друг другу: - проба должна быть настолько малой, чтобы не ухудшалось разделение компонентов; - проба должна быть настолько большой, чтобы при заданных условиях хроматографирования и детектирования количество определяемого вещества можно было измерить.
В количественном хроматографическом анализе следует стремиться к получению хроматограмм с гауссовыми пиками. Измерение асимметричных пиков, как правило, проводится с меньшей точностью.
Рисунок. К определению фактора асимметричности хроматографического пикаДля определения принадлежности формы хроматографического пика к гауссовой удобно использовать отнесение ширины пика при основании к полуширине пика. Для истинно гауссовых пиков должно соблюдаться равенство: α = 1,698·а0,5 В условиях реальной газовой хроматоргафии в первом приближении можно считать пик симметричным (гауссовым), если величина а/а0,5 находится в пределах 1,67-1,73.
Теория теоретических тарелок
Теория теоретических тарелок разработана для описания процесса дистилляции (1952 г , Мартин и Синдж, Нобелевская премия за открытие распределительной хроматографии), однако она является общей для всех многостадийных процессов и позволяет оценить эффективность колонки.
Теория теоретических тарелок является формальной и основана на представлении, что хроматографируемое вещество проходит через слой сорбента не непрерывным потоком, а порциями, распределяясь между подвижной и неподвижной фазами на отдельных элементарных участках слоя - так называемых «тарелках». Через каждую такую тарелку вещество проходит периодическими толчками. При этом предполагается, что за время каждого толчка, т. е. практически мгновенно, на тарелках успевает установиться равновесие распределения всех компонентов между подвижной и неподвижной фазами.
Таким образом, согласно этой теории, хроматографический процесс является многоступенчатым и состоит из большого числа актов сорбции=десорбции или растворения=испарения компонентов анализируемого вещества в хроматографической колонке, а сама колонка рассматривается как совокупность многих дискретных ступеней - тарелок, хотя в действительности слой адсорбента или пленка неподвижной жидкой фазы в колонке является непрерывным. Анализируемое вещество вместе с элюентом попадает на первую тарелку. Новая порция элюента, подаваемая на первую тарелку, приводит к новому распределению вещества между подвижной и неподвижной фазами, причем часть вещества с данной тарелки переносится на следующую. На этой тарелке также мгновенно устанавливается равновесие, а часть вещества уносится на следующие тарелки. Вследствие этого с каждой новой порцией элюента концентрация вещества на первой тарелке падает, а на последующих возрастает.
В результате такого перемещения и перераспределения хроматографируемое вещество оказывается не на одной, а на нескольких тарелках, причем на средних его концентрация достигает максимального значения по сравнению с соседними, так как свежие порции элюента, поступающие в колонку, встречают на первых тарелках все меньшие количества данного компонента в неподвижной фазе. Таким образом, вещество размывается по некоторой толщине слоя неподвижной фазы в колонке, по нескольким тарелкам, причем, чем сильнее размывание, тем большее число тарелок занимает вещество. Следовательно, число тарелок, занимаемых данным компонентом анализируемого вещества, может служить мерой степени размывания вещества по слою адсорбента, мерой эффективности колонки.
Такой прием замены реального процесса, протекающего в реальной хроматографической колонке непрерывно и неравновесно, эквивалентным по результатам многоступенчатым дискретным процессом, также приводящим к размыванию полосы компонента, позволил на основании теории скоростей вывести уравнение хроматографической кривой, т.е. дал математическую модель продвижения полосы компонента через колонку.
Гауссов характер хроматографического пика обусловлен беспорядочным статистическим характером перемещения большого числа частиц вещества в хроматографической колонке. Одни частицы передвигаются в ней быстрее, другие медленнее, и значения скорости перемещения имеют симметричный разброс относительно среднего значения, характеризующего поведение в колонке некоторой усредненной молекулы.
| №1 | №2 | №3 | №4 | №5 | №6 | №7 |
| 64 | | | | | | |
| 32 | 32 | | | | | |
| 16 | 32 | 16 | | | | |
| 8 | 24 | 24 | 8 | | | |
| 4 | 16 | 24 | 16 | 4 | | |
| 2 | 10 | 20 | 20 | 10 | 2 | |
| 1 | 6 | 15 | 20 | 15 | 6 | 1 |
Если длину слоя сорбента в колонке (длину колонки) L, на которой осуществляется разделение смеси веществ и расположено некоторое число n теоретических тарелок, необходимое для разделения анализируемой смеси веществ, разделить на это число n, то получается величина Н, называемая высотой, эквивалентной одной теоретической тарелке (ВЭТТ):
(28)
Высота эквивалентной теоретической тарелки представляет собой толщину слоя сорбента, необходимую для установления равновесного распределения вещества между подвижной и неподвижной фазами. Таким образом, число теоретических тарелок n и высота эквивалентной теоретической тарелки Н являются величинами, характеризующими эффективность хроматографической колонки. Высота эквивалентной теоретической тарелки выражают в единицах длины, как правило в миллиметрах.
Так как w = 4s мм, экспериментально Н можно определить как дисперсию, приходящуюся на единицу длины колонки L,мм, непосредственно из хроматограммы, используя полученное на хроматограмме значение ширины пика w у его основания для нахождения величины s:
(29)Так как
, то 
. Приняв время удерживания tR эквивалентом длины колонки, можно установить, что число теоретических тарелок n равно:
(30)Если ширина пика измерена на середине его высоты, то w1/2 = 2,35 s и
(31)Под эффективностью в хроматографии понимают способность системы "предотвращать" (ограничивать) размывание зон разделяемых веществ. Эффективность колонки тем выше, чем уже пик получается при том же времени удерживания, и измеряется числом теоретических тарелок. Хроматографическая колонка считается высокоэффективной, когда размывание полос небольшое, пики узкие, высота Н составляет 0,3-1 мм. В идеальном случае величина Н приближается к диаметру dp зерна сорбента. При уменьшении значения Н максимумы на хроматограмме становятся более острыми.
Для сравнения эффективности двух хроматографических колонок следует использовать приведенную высоту h тарелки:
(32)Теория теоретических тарелок позволяет сравнить эффективность различных колонок, оценить качество сорбента и заполнения колонки. Но эта теория не позволяет выявить зависимость эффективности работы хроматографической колонки от скорости подачи подвижной фазы, природы и дисперсности сорбента, не может дать практических рекомендаций, позволяющих минимизировать размывание хроматографических пиков.
