Файл: Отчет по лабораторной работе 2 Оценка основных параметров роста микроорганизмов в условиях периодического культивирования.docx
Добавлен: 19.03.2024
Просмотров: 17
Скачиваний: 1
ВНИМАНИЕ! Если данный файл нарушает Ваши авторские права, то обязательно сообщите нам.
Для определения редуцирующих веществ (РВ) в культуральной жидкости использовали фотометрический метод.
Методика определения РВ фотометрическим способом.
Приготовление реактивов: В работе используются 2 раствора: раствор 1 объемом 500 мл готовят растворением 8,65 г пентагидрата сульфата меди (II) в дистиллированной воде; раствор 2 объемом 500 мл готовят растворением 25 г сегнетовой соли, 2 г желтой кровяной соли и 37,5 г гидроксида натрия в дистиллированной воде.
Проведение фотометрической реакции. В пробирке смешивают по 2 мл растворов 1 и 2 и 2 мл рабочего раствора, содержание РВ в котором находится в диапазоне 0,5-1,5 мг/мл (при необходимости рабочий раствор готовят разбавлением анализируемого раствора). Затем пробирку с реакционной смесью нагревают на кипящей водяной бане в течение 3 минут.
Измерение оптических плотностей рабочего и холостого определений. Реакционную смесь, полученную после проведения реакции, сразу же переносят в кювету и измеряют оптическую плотность при 670 нм (рабочее определение). Также измеряли оптическую плотность при 670 нм аналогичной реакционной смеси, не подвергнутой нагреванию (холостое определение).
Расчет концентрации РВ. Концентрацию РВ, мг/мл, в рабочем растворе вычисляют по формуле
РВ'=(Ахол– Араб+0,012)/0,2946,
где Ахол, Араб – оптические плотности при 670 нм, полученные в ходе соответственно холостого и рабочего определений;
0,012 – поправка, связанная с увеличением поглощения при 670 нм собственно меднощелочного раствора при нагревании в течение 3 мин; 0,2946 – абсолютное значение тангенса угла наклона градуировочной кривой.
Расчет концентрации РВ (мг/мл) в анализируемом растворе производят с учетом степени разбавления:
РВ=R∙РВ',
где R – степень разбавления исходного объекта.
-
Обработка полученных результатов. По результатам эксперимента построили графики роста культуры в периодических условиях. Определили продолжительность индукционного периода, удельную скорость роста культуры и экономический коэффициент.
| lnx(1) | lnx(2) | |
| -1,715 | -1,609 | 0 |
| -1,609 | -1,561 | 1 |
| -1,537 | -1,427 | 2 |
| -1,470 | -1,406 | 3 |
| -1,470 | -1,386 | 4 |
Индукционный
период
Фаза
экспоненциального
роста
Фаза
линейного роста
роста
Стационарная фаза
Продолжительность индукционного периода – 0,5 часа.
Удельная скорость в экспоненциальной фазе:
ч-1.Общий экономический коэффициентпри потреблении всего субстрата:
Расчет концентрации РВ:
| Параметры | Время, ч | ||||
| 0 | 1 | 2 | 3 | 4 | |
| Ахол(1) | 0,55 | 0,51 | 0,52 | 0,47 | 0,54 |
| Араб(1) | 0,56 | 0,48 | 0,55 | 0,41 | 0,42 |
| РВ'(1), мг/мл | 0,007 | 0,143 | -0,061 | 0,244 | 0,448 |
| РВ(1), мг/мл | 0,339 | 7,128 | -3,055 | 12,220 | 22,403 |
| Ахол(2) | 0,55 | 0,51 | 0,56 | 0,46 | 0,51 |
| Араб(2) | 0,61 | 0,48 | 0,89 | 0,25 | 0,44 |
| РВ'(2), мг/мл | -0,163 | 0,143 | -1,079 | 0,754 | 0,278 |
| РВ(2), мг/мл | -8,147 | 7,128 | -53,971 | 37,678 | 13,917 |
R=50 во всех пробах (0,1 мл пробы + 4,9 мл воды)
Вывод: в ходе данной лабораторной работы был изучен рост культуры дрожжей Rhodotorulaglutinis в условиях периодического культивирования, построен график роста культуры в периодических условиях для определения продолжительности индукционного периода, проведены расчеты основных параметров количественной оценки (удельной скорости роста в экспоненциальной фазе, общего экономического коэффициента, концентрации РВ).