ВУЗ: Не указан
Категория: Не указан
Дисциплина: Не указана
Добавлен: 28.03.2024
Просмотров: 16
Скачиваний: 0
ВНИМАНИЕ! Если данный файл нарушает Ваши авторские права, то обязательно сообщите нам.
Кишечая палочка-возбудитель эшерихиозов
Лабораторна диагностика
Материалом для исследования при внекишечных формах эшерихиозов служит гной, кровь, желчь, моча; при кишечных-испражнения, рвотные массы. В качестве материала используют смывы с игрушек, рук персонала, роддомов, больниц, молочных кухонь, пищевые продукты. Основной метод исследования- бактериологический. Производят посев материала на среду Эндо, выделяют чистую культуру и идентифицируют по биохимическим свойствам на средах Гисса и антигенным свойством в реакции агглютинации с ОК- и О-агглютинирующими сыворотками.
Возбудитель холеры
Лабораторная диагностика.
Основным методом лабораторной диагностики холеры является бактериологический. Материалом для исследования служат испражнения, рвотные массы, секционный материал, а также вода, пищевые продукты. В связи с тем, что холера- особо опасная инфекция, исследования проводятся в специализированных лабораториях.
Диагностика холеры осуществляется поэтапно:
1) Из испражнений готовят мазки, окрашивают по Граму и разведенным фуксином. В мазках обнаруживают изогнутые палочки, расположенные в виде стаек рыб.
2) Производят посев исследуемого материала на 1%-ную щелочную пептонную воду и щелочной агар для выделения чистой культуры.
3) Идентифицируют выделенную культуру по: морфологическим признакам (в мазке); подвижности в препарате «висячая капля»; ферментативным свойствам на средах Гисса (отсутствие ферментации арабинозы), на мясо-пептонном желатине (воронкообразное разжижение) и нитрозоиндоловой пробе (розовое окрашивание вследствие появления нитрозоиндола под влиянием холерного вибриона);антигенным свойствам в реакции агглютинации с О1 агглютинирующей сывороткой.
4) Для дифференциации биовара V. cholerae и биовара el-tor исследуют гемолитические свойства выделенной культуры, определяют ее чувствительность к полимиксину и бактериофагам. Биовар V. cholerae эритроциты барана не гемолизирует, чувствителен к полимиксину и бактериофагу С Мукерджи четвертого типа.
Биовар el-tor вызывает гемолиз бараньих эритроцитов, устойчив к полимиксину, лизируется бактериофагом el-tor II.
Окончательное заключение о выделенной культуре выдают через 36-48 часов.
Для ретроспективной диагностики применяют серологический метод - реакцию агглютинации и реакцию непрямой гемагглютинации. Ускоренные методы диагностики: иммунофлюоресцентый;иммобилизация вибрионов О1 холерной сывороткой.
Возбудитель сибирской язвы
Лабораторная диагностика.
Материал для исследования берут в соответствии с формой заболевания: содержимое карбункула, кровь, мокрота, рвотные массы, испражнения. Основные методы исследования- микроскопический и бактериологический.
Сначала используют микроскопический метод. Для выявления капсулы препараты окрашивают по Граму, а также по Ребингеру.
С целью выделения чистой культуры возбудителя материал высевают на МПА и МПБ, идентифицируют по отсутствию лецитиназной и фосфатазной активности, способности к капсулообразованию, ставят пробу с сибиреязвенным бактериофагом и пенициллином («жемчужное ожерелье»). Этот тест основан на способности В. anthracis в растущих культурах на средах, содержащих 0,1-0,05-0,5 ЕД пенициллина, образовывать после трех-шести часов инкубирования характерные шаровидные формы микроорганизмов, напоминающие «жемчужное ожерелье».
Заражение лабораторных животных (биологический метод) производится для выделения чистой культуры и оценки се вирулентности. Для обнаружения бесклеточного сибиреязвенного антигена в трупном материале, кожевенном и меховом сырье широко используют реакцию термопреципитации по Асколи. Диагностическое значение имеет также кожная аллергическая проба с антраксином. Внутрикожное введение заболевшему этого вещества приводит к развитию на этом месте гиперемии и инфильтрации.В качестве экспресс-метода для диагнг сибирской язвы используют люминесцентно-серологический.
Возбудители трихомикозов
Возбудитель трихофитии
Диагностика.
Диагноз устанавливается на основании учета клинической картины поражения, морфологии гриба в волосе при микроскопическом исследовании в 20-30 %-ной щелочи и культуре гриба, полученной на среде Сабуро.
Возбудитель микроспории
Диагностика основывается на характерной клинической картине поражения волосистой части головы.
Возбудитель эпидермофитии стоп
Лабораторная диагностика основывается на обнаружении при исследовании в едкой щелочи нитей мицелия в чешуйках кожи, покрышках пузырьков, соскобах с глубоких частей пораженных ногтей и на характерных клинических симптомах и локализации высыпаний.
Возбудитель криптококкоза
Лабораторная диагностика. Исследуют спинномозговую жидкость, гной абсцессов, соскобы с грануляций, биоптаты тканей. При окраске по Граму криптококки отрицательны.
Возбудитель хромомикоза
Лабораторная диагностика. Микроскопически исследуют чешуйки, корочки, гной. В 10-15 %-ном растворе едкой щелочи грибы имеют вид овальных, округлых, многоугольных или неправильной формы клеток.
Возбудитель ботулизма
Лабораторная диагностика. Цель лабораторных исследований обнаружение типа ботулинического токсина и возбудителя ботулизма в материалах, взятых от больного. Ими могут быть рвотные массы, промывные воды желудка, кровь. Исследуются пищевые продукты, явившиеся причиной отравления; при пост-мортальном исследовании используется трупный материал.
Бактериологический метод предполагает выделение чистой культуры на среде Китта-Тароцци, кровяном и сахарном агаре с последующей идентификацией по ферментативным и антигенным свойствам.
Биологический метод связан с постановкой реакции биологической нейтрализации токсина соответствующей специфической антитоксической сывороткой, при этом устанавливают антигенный тип токсина. Белые мыши, защищенные специфическим типом антитоксина, остаются живыми после введения соответствующего токсина, тогда как контрольные животные без такой защиты погибают.
Возбудитель кандидомикозов
Лабораторная диагностика. Материалом для исследования служат: кожные и ногтевые чешуйки, отделяемое пораженных участков слизистых оболочек, гной, кал, моча, кровь, спинномозговая жидкость, биоптаты тканей.
Диагностика основывается на двух методах: микроскопическом с использованием мазков, окрашенных метиленовым синим, по Граму или другим способом; микологическом с посевом исследуемого материала на питательные среды (агар Сабуро, сусло-агар или кандида-агар).
-
Получение только культуры Сandida при посеве патологического материала не дает права для диагноза кандидомикоза, за исключением выделения возбудителя из крови. -
Большое значение для диагностики кандидозов придается серологическим реакциям: реакция агглютинации, реакция преципитации, реакция связывания комплемента с растворимыми антигенами. Однако из-за перекрестных антигенов, общих с другими грибами, эти реакции не всегда информативны, поэтому в настоящее время используют реакцию иммунодиффузии, иммуноэлектрофореза, непрямой гемагглютинации и реакцию агглютинации латекса. -
Hеполные антигены и неполные антитела можно обнаружить в реакции торможения непрямой гемагглютинации и в реакции непрямой иммунофлюоресценции. Имеет место также диагностическое использование аллергических проб, реакции специфического лизиса лейкоцитов, дегрануляция базофилов.
Возбудители дифтерии
Лабораторная диагностика. Бактериологический метод основан на выделении чистой культуры и идентификации возбудителей по культурально-морфологическим, биохимическим и токсическим свойствам. Объектом для исследования служит отделяемое зева, носа, глаз, кожи и прочее, которое берут ватным тампоном и высевают на среду Клауберга или кровяной теллуритовый агар. Перечисленные среды содержат 0,04 % теллурита калия, который подавляет рост сопутствующей микрофлоры (стафилококки, стрептококки).Через 24-48 часов культивирования производят микроскопию мазков и дают предварительный ответ. Дифтерийные коринобактерии не всегда бывают морфологически типичными, в ряде случаев возбудитель принимает форму коротких палочек, расположенных не под углом, а беспорядочно, со слабовыраженной зернистостью. Кроме того, образование гранул волютина происходит не всегда и, следовательно, этот признак не является абсолютным. Наиболее достоверный метод-токсинообразование. Дифференциацию токсигенных и нетоксигенных штаммов производят по методу Оухтерлони (метод двойной иммунодиффузии в чашках Петри или метод преципитации в агаре). Он основан на способности дифтерийного экзотоксина вступать в соединение с антитоксином и образовывать преципитаты в виде стрел-усиков. Серологические реакции применяют для изучения коллективного иммунитета. Они включают: РПГА, отличающуюся высокой чувствительностью, проводимую с антительным диагностикумом; реакцию Шика, проводимую для определения индивидуальной невосприимчивости к дифтерийному токсину; реакцию нейтрализации цитотоксического действия дифтерийного токсина в культуре ткани; РИА; иммуноферментный анализ (ИФА).
возбудитель столбняка
Лабораторная диагностика. В основе диагностики обнаружение возбудителя или его токсина. Материалом служат взятые из раны кусочки омертвевшей ткани, пропитанные раневым экссудатом тампоны, мокрота или слизь из дыхательных путей, рубцы, оставшиеся после ранения. Сочетают бактериоскопию (мазки-отпечатки) и посевы на питательные среды. Перед посевом исследуемый материал (кусочки ткани) гомогенизируют в двойном объеме физиологического раствора и высевают на среду Китта-Тароцци. Для устранения сопутствующей микрофлоры инфицированные посевы 20 минут прогрева- ют при 80 °С. Для обнаружения токсина растертый в ступке исследуемый материал (или культуральную жидкость) выдерживают при комнатной температуре 1 час, после чего смешивают с противо-столбнячной сывороткой (1 мл экстракта плюс 0,5 мл разведенной сыворотки, со- держащей 200 МЕ в 1 мл). Смесь выдерживают 40 минут и вводят внутримышечно белым мышам. Контрольным животным исследуемый материал вводят без сыворотки. Используют также агглютинирующие и люминесцирующие сыворотки.
возбудитель эпидемического возвратного тифа
Лабораторная диагностика. Микроскопический метод основывается на обнаружении возбудителя в крови. Во время приступа лихорадки приготавливают мазок и толстую каплю крови, окрашивают их по методу Романовского-Гимза. Окрашенные спирохеты легко распознаются по характерной форме. Спирохету, благодаря се подвижности, можно увидеть и в неокрашенных мазках свежих препаратов крови, используя после разведения физиологическим раствором метод висячей капли, или при исследовании препарата в темном поле зрения.Серологические методы исследования (реакция агглютинации, pеакция связывания комплемента) имеют меньшее значение.
возбудитель эндемического клещевого возвратного тифа
Лабораторная диагностика. Решающим является обнаружение спирохет в крови больного. Методика исследования та же, что и при вшивом возвратном тифе, однако при данном заболевании количество возбудителей значительно меньше и их не всегда можно обнаружить. Особенно важное значение имеет биологический метод— заражение кровью больного морских свинок, восприимчивых к этой болезни (к возбудителям вшивого возвратного тифа морские свинки устойчивы). Серологические реакции не нашли широкого применения.
Возбудитель брюшного тифа
Лабораторная диагностика разработана на основе патогенеза болезни. На первой неделе заболевания, когда интенсивность бактериемии наиболее высока, применяется бактериологический метод - посев крови на среду Раппопорт или желчный бульон для выделения гемокультуры. На второй неделе брюшного тифа проводится серологическая диагностика для определения антител в сыворотке крови больного. С этой целью ставят реакцию агглютинации (реакция Видаля). Реакция Видаля может быть положительной только у больных, а и у переболевших вакцинированных, но у больных в разгар болез- ни находят О-Н-агглютинины, у привитых и переболевших только Н-агглютинины.
Для серологической диагностики брюшного тифа и паратифов А и В применяют реакцию непрямой гемагглютинации с Vi - О-антигенами и, являющуюся более чувствительной, чем реакция Видаля.
В период реконвалесценции, когда возбудители в большом количестве покидают организм с испражнениями и мочой, выделяют копро- и уринокультуру, высевая испражнения на висмут-сульфит агар и мочу на среду обогащения.
