ВУЗ: Не указан
Категория: Не указан
Дисциплина: Не указана
Добавлен: 28.03.2024
Просмотров: 17
Скачиваний: 0
ВНИМАНИЕ! Если данный файл нарушает Ваши авторские права, то обязательно сообщите нам.
Одним из современных методов диагностики являются иммуноферментный и иммунорадиометрический анализы.
Возбудитель Бруцеллы
Лабораторная диагностика проводится с использованием бактериологического и серологического методов.
При бактериологическом методе выделяются уринокультуры, миелокультуры, но чаще всего - гемокультуры. Для этого взятую непосредственно от больного венозную кровь выссвают на сахар- ный или печеночный бульон. Бруцеллы растут очень медленно, их культуры обычно обнаруживают через 1-30 суток.
При серологических исследованиях наиболее широко используют pеакции агтлютинации (Райта, Хеддльсона), пассивной гемагглютинации, реакцию связывания комплемента, реакцию Кумбса, иммуно- флюоресценции с использованием антиглобулиновых сывороток. Положительные результаты реакции агглютинации, реакции пассив- ной гемагглютинации указывают на активность процесса, а при хро- непрямой иммунофлюоресценции, напротив, свидетельствуют о воля текущих хронических формах демонстрируют низкие титры. Реакции Кумбса и непрямой иммунофлюростенции напротив свидетельствует о вяло текущих хронических инфекционных процессах и имеют большое диагностическое значение, особенно при других отрицательных реакциях.
Широко используют в лабораторной диагностике аллергическую пробу с бруцеллином (реакцию Бюрне), дающую положительные результаты при латентном течении болезни и у привитых людей.
Возбудитель бактериальной дизентерии
Лабораторная диагностика основана бактериологических серологических исследованиях.
Для бактериологического анализа у больных берут испражнения (обязательно до назначения этиотропных препаратов) или комочки слизи, гноя, крови в испражнениях и делают посев на чашки Петри с дифференциально-диагностическими средами Эндо, ЭМС, Плоскирева и на селенитовую среду, содержащую феноловые производные, которые тормозят рост сопутствующей микрофлоры. Через 18-24 часа инкубирования в термостате на чашках выбирают бесцветные лактозоотрицательные колонии и пересевают на скошенный агар для выделения чистой культуры, которую идентифицируют по биохимическим свойствам и антигенной структуре.
Для серологической диагностики дизентерии используется ре- акция непрямой гемагглютинации (РHГА) с эритроцитарными диагностикумами. РНГА проводят повторно с интервалом не менее семи дней («парные сыворотки»). Диагностическое значение имеет нарастание титра антител вчетверо, выявляющееся с 10-12-го дня болезни.
Возбудитель менингококка
Лабораторная диагностика. Исследуемым материалом является спинномозговая жидкость, кровь, смыв с носоглотки. Применяют бактериоскопический, серологический методы диагностики.
Бактериоскопический метод используют при микроскопии окрашенных по 1 раму и Леффлеру мазков из осадка спинномозговой жидкости. Выделение чистой культуры и ее идентификацию проводят на специальных средах с помощью тестов на оксидазную активность, ферментативные и антигенные свойства. Серодиагностику проводят, используя рeакции преципитации, связывания комплемента.
Бактериологическое исследование связано с посевом на специальные среды – асцит-агар, асцит-бульон, сывороточные среды.
Серологическая диагностика проводится с помощью реакции связывания комплемента, непрямой гемагглютинации.
Возбудитель туберкулеза
Материалом для исследования служат мокрота, гной, спинномозговая или плевральная жидкость, моча, испражнения, пунктаты лимфатических узлов.
Нативный материал после обогащения исследования бактериоскопическим окрашиванием мазков по Цилю-Нильсену или люминисцентно с использованием ауромина.
Бактериологический метод. Исследуемый материал после предварительной обработки 5 %-ной серной кислотой или 10 %-ным этидовым спиртом в течение 15-20 минут засевают на стандартную среду Левенштейна-Йенсена для выделения чистой культуры. Применяется также метод микрокультур Прайса, который позволяет вырастить микобактерии в течение трех-десяти дней. Биологический метод. В качестве высокочувствительной модели используют морских свипок, которым вводят нативный материал или выделенную чистую культуру подкожно, внутрибрюшинно или в головной мозг. Последний метод исследования дает наиболее быстрое развитие туберкулезной инфекции (через 10-12 дней). Животные погибают от генерализованного туберкулеза с поражени- ем периферических лимфатических узлов, легких, печени, селезенки, почек.
Серологические методы. Реакция связывания комплемента, реакция непрямой гемаглютинации с эритроцитами барана, нагруженными полисахаридом или туберкулином, предназначена для вы- явления специфических антитсел в сыворотке больных туберкулезом. Кожная туберкулиновая (аллергическая) проба Манту - наиболее распространенная, высокочувствительная, объективная диагностическая реакция.
Возбудитель сифилиса
Лабораторная диагностика сифилиса слагается из двух методов: бактериоскопического и серологического.
Для бактериоскопического исследования пользуются тканевой жидкостью из шанкра, пунктатом из лимфоузла. Полученный материал исследуют в затемненном поле зрения, где бледная трепонема выявляется в живом виде. Диагностически учитывают морфологи- ческие особенности возбудителя.
Для серологической диагностики используют сыворотку больного. Проводят: комплекс серологических рсакций (реакция связывания комплемента - реакция Вассермана и две осадочные реакции: Кана, Закса-Витебского, или цитохолиевая); реакцию иммобилизации трепонем (РИТ), она положительна, если подвижность утратили 50% трепонем, и отрицательна, если менее 20 %; реакцию иммунофлюоресценции (РИФ); микрореакцию с кардиолипиновым антигеном для экспресс-диагностики сифилиса при массовых обследованиях населения.
Возбудитель стафилакокка
Лабораторная диагностика. В качестве исследуемого материала используют гной, мочу, кровь, мокроту, отделяемое слизистых оболочек; при токсикоинфекциях рвотные массы, промывные во- ды, испражнения. Используют бактериоскопический и бактериологический метод.
При бактериоскопическом методе используют окраску по Граму, определяя в мазке типичные морфологические признаки. Несмотря на то, что стафилококки принадлежат к наиболее легко обнаруживаемым и распознаваемым коккам, при подтверждении диагноза возникают определенные трудности в связи со следующим:
1)стафилококки обладают большим разнообразием проявлений биологической активности, зависящей от разных, не всегда учитываемых факторов, а также выраженной морфологической широкой изменчивостью, в том числе и под влиянием антибиотиков;
2)стафилококки являются представителями нормальной микрофлоры из группы условно-патогенных микробов, и наряду с непатогенными, патогенные стафилококки обитают в организме людей, распространяясь в нем весьма неравномерно. Например, применение антибиотиков в неактивных дозах способствует образованию л-форм стафилококков, которые, обладая не рядом нетипичных свойств, сохраняют основное - вызывать гнойновоспалительный процесс.Хронические стафилококковые инфекции чаще всего и вызываются л-формами возбудителя. Существует также мнение, что белый стафилококк
, не вызывающий коагуляции плазмы и не типирующийся специфическими фагами, то есть не обладающий классическими признаками патогенности, ответственен за гнойно-воспалительные осложнения в хирургии.
Бактериологический метод. Для выделения чистой культуры производят посев на желточно-солевой, молочно-солевой, кровяной агары. Идентификацию проводят по гемолитическим свойствам, лецитовителлазной активности, плазмокоагулирующей и гиалуронидазной способности и характеру пигмента. Обязательным тестом на болезнетворность является также подтверждение способности расщеплять магнит в анаэробных условиях. Для выявления источников инфекции проводят фаготипирование. В связи с широким распространением антибиотикоустойчивых штаммов определяют чувствительность к антибиотикам. Профилактика и лечение.
Возбудитель стрептококка
Лабораторная диагностика. Исследуемым материалом являются мокрота ,гнойное отделяемое, кровь ,моча, испражнения. Используют бактериоскопический , бактериологический, серологический методы исследования.
Бактериоскопический метод предполагает окраску мазков по Грам (грамположительны)и наблюдение характерного расположения бактерий попарно и в виде цепочек.
Бактериологический метод связан с выделением чистой культуры на кровяном агаре и сахарном бульоне с ее последующим идентификацией.
Серологическая диагностика заключается в определении в сыворотке крови О-стрептолизина, антистрепногиалуронидазы, стрептокиназы , в том числе с люминесцентными сыворотками.
Возбудители пищевых токсиноинфекций.
Лабораторная диагностика. Из лабораторных методов наиболее важное значение имеют бактериологический и серологический.
Бактериологическому методу исследования могут подвергаться испражнения больных, рвотные массы, промывные воды желудка, моча, кровь, желчь.
Из серологических методов применяют реакцию агглютинации и непрямой геагглютинации.
Возбудитель гонококковой инфекции
Материалом для исследования - гнойное отделяемое уретры, влагалища, шейки матки, предстательной железы и других органов, пораженных гонококком.
Бактериологические метод. Включает посев на безасцитные среды при следующих условиях: pH от 7,2 до 7,4, содержание углекислого газа в атмосфере 10-20%, температура 37°С. Все колонии гонококка имеют круглые очертания, ровные края, блестящую поверхность. При микроскопии по методу Грама - грамотрицательными кокки, беспорядочно рассыпанными по периферии скопления и более густо расположенными в центре. Вырабатывают цитохромоксидазу (выявляется путем заливки поверхности 1% водным раствором диметилпарафенилендиамина -покраснение колоний гонококка, а затем почернение), расщепляет глюкозу до кислоты.
ПЦР при подозрении гонореи. Процесс диагностики гонореи основан на копировании определенного участка ДНК, соответствующего заданным параметрам.
Серологический метод. Включают различные способы регистрации реакций «антиген-антитело». Для выявления гонококковой инфекции используется реакция Борде-Жангу (РСК
Возбудитель газовой анаэробной инфекции
Возбудители - Clostridium perfringens, С. novyi, С. septicum, С. histolyticum, С. difficile и др. Материалом для исследования служат кусочки пораженной и некротизированной ткани, жидкость отеков, кровь. При пищевых токсикоинфекциях, вызванных клостридиями, исследуют рвотные массы, промывные воды желудка, кал.
Используют микроскопический, бактериологический и биологический методы исследования.
Микроскопический метод. Готовят мазки - отпечатки из патологического материала, окрашивают по Граму и Бури-Гинсу. При обнаружении в мазках по Граму большого количества грамположительных грубых или полиморфных палочек, а при окраске по Бури-Гинсу капсул можно предположить, что у больного газовая анаэробная инфекция. Используют также люминесцентную микроскопию. Мазок-отпечаток обрабатывают иммунофлуюоресцентной видоспецифической сывороткой и изучают в люминесцентном микроскопе. Вокруг микробных клеток обнаруживают желто-зеленое свечение.
Бактериологический метод. Патологический материал растирают в ступке с кварцевым песком и готовят 10% гомогенат на физиологическом растворе. Делят его на 2 части. Первую часть гомогената прогревают на водяной бане при температуре 80ºС в течение 20-30 минут для уничтожения вегетативной микрофлоры. Жидкость из отека и кровь центрифугируют 30 минут при 3000 об. мин. Для посева используют осадок. Исследуемый материал высевают на следующие питательные среды: кровяной агар Цейсслера, желточный агар, в глубину столбика висмут - сульфит агара, на бензидиновый агар, среду Виллиса-Хоббса, СКС, в 5 пробирок со средой Китта-Тароцци, 4 из которых перед посевом кипятят в течение 20 минут, а затем быстро охлаждают. 1 пробирка остается без прогрева. Целесообразно засевать материал для исследования в мясопептонный агар и сахарный агар, которыми заполняют пастеровские пипетки. Посевы помещают в анаэростаты и ежедневно наблюдают рост на плотных питательных средах. Посевы в жидких питательных средах выращивают в обычных условиях в термостате в течение 15 суток.
Чистую культуру анаэробных микробов идентифицируют на основе:
