ВУЗ: Не указан
Категория: Не указан
Дисциплина: Не указана
Добавлен: 16.10.2024
Просмотров: 26
Скачиваний: 0
стя 24, 48 и 72 ч испытывалось бактерицидное действие этой воды на кишечную палочку. Время контакта с бак териями составляло 24 ч, после чего делали посев на обычные среды. Проволока испытывалась как с отмытой (25%-ным раствором аммиака), так и с неотмытой по верхностью. Опытами доказано, что отмытое серебро те ряет свои бактерицидные свойства. Аналогичные опыты С. В. Мойсеева [45] с посеребренным песком подтверди ли это.
Не менее наглядные результаты получены Тиле и Вольфом. Они изучили экспериментально бактерицид ный эффект нескольких гальванических пар: серебряная жесть — золото, серебро — платина, серебряный поро шок — палладий, уголь — серебро.
Тиле и Вольф показали, что в образующихся гальва нических элементах биологически активными являются растворимые электроды. Вокруг катодов таких гальвани ческих пар стерильная зона не наблюдалась или была не значительной, а вокруг серебряного анода она была ши ре, чем вокруг пластинки из того же металла, не вклю ченного в электродную пару. Добавление 0,00005 а угля к 1 г серебряного порошка значительно усиливало бак- -терицидный эффект.
Исследования автора данной брошюры, как и позд нее опубликованные работы других исследователей, под тверждают приведенные выше факты и позволяют сде лать вывод о том, что именно ионы металлов и их ионо-
ния основных единиц старых систем, встречающихся в работе, и еди ниц системы СИ:
1 аг=9,81 - 104 к/ж2=0,981 бар,
1 г = 10_3 кг,
1 л = 10-3 ж3,
1 ма= 10“3 а,
1° С = 1° К—273,15“.
12
генные соединения (вещества, способные в воде распа даться на ионы) вызывают гибель микроорганизмов. Во всех случаях при бактерицидном эффекте степень актив ности серебра тем больше, чем выше концентрация ионов в растворе [23, 24, 25, 27, 28, 29, 30].
Образование электродных пар способствует переходу активного металла в раствор в виде ионов. По той же причине оксидированные металлы (покрытые пленкой из окиси или перекиси того же металла) обладают большей активностью, чем неоксидированные. Посторонние веще ства в воде отрицательно влияют на бактерицидность, если они связывают ионы серебра в малодиссоциированные или труднорастворимые, выпадающие в осадок сое динения.
Что касается влияния ионного серебра непосредствен но на бактерии, то по данному вопросу единого мнения не существует. Известно, что бактерии с отрицательным электрическим зарядом протоплазмы притягивают к се бе положительно заряженные ионы серебра. При сопри косновении ионов серебра с бактериями последние гиб нут.
Некоторые исследователи особое значение придают физико-химическим процессам, протекающим в прото плазме бактерий. В 1921 г. Вернике высказал предполо жение о том, что действие ионов серебра на бактерии со стоит в окислении протоплазмы кислородом, растворен ным в воде, причем серебро играет роль катализатора. Исходя из этого, можно предположить, что ионы метал лов являются главным образом передатчиками кислоро да, а само окисление заключается как в непосредствен ном присоединении кислорода, так и в дегидрировании соединений протоплазмы. Эта точка зрения разделяется некоторыми исследователями.
13
Среди многочисленных теорий о характере действия серебра на микроорганизмы одной из наиболее распро страненных является адсорбционная теория, которой при держивались Вигнати и Шнабель [120], Ляйтнер [95], Зюпфле [114], Жакоб и Мано [90], Циммерман [124, 125] и др. Основное положение этой теории сводится к тому, что клетка теряет жизнеспособность в результате взаи модействия электростатических сил, возникающих между отрицательно заряженной протоплазмой бактерии и по ложительно заряженными ионами серебра, и адсорбции ионов серебра на бактериальной клетке. В доказатель ство адсорбционной теории многими исследователями по лучены убедительные данные. Так, Ляйтнер [95] устано вил, что в комплексе «бактерия — серебро» последнее можно вытеснить веществами, ионы которых сильно взаи модействуют с поверхностью бактерий. При этом анти микробное действие серебра ослабевает.
Фрейндлих и Солнер [84] путем химического анализа обнаружили адсорбированное серебро на клетках олиго динамически умерщвленной водоросли.
П. Ф. Кна'фельман [21] методом титрования ионов се ребра, оставшихся в растворе после адсорбции, устано вила, что степень адсорбции весьма высокая и вполне до статочная для того, чтобы вызвать гибель бактериальной клетки.
С. Н. Черкинский [71] также является сторонником адсорбционной теории. По его мнению, при электроад сорбции ионы тяжелых металлов вначале задерживают ся на поверхности бактериальной клетки, затем проника ют внутрь, образуя альбуминаты и соединения с нуклеи новыми кислотами.
Другой теории придерживались Орцеховский и Штольц [105]. На основании проведенных исследований
14
они высказали предположение об отсутствии непосред ственного олигодинамического действия серебра на бак териальную клетку. По их мнению, серебро, образуя ком плексные соединения, является переносчиком С1-ионов. Положительно заряженные ионы серебра подводят отри цательно заряженные Cl-ионы к поверхности микробной клетки, где они, соединяясь с водородом, образуют соля ную кислоту, вызывающую «ферментативную анархию» в микробных клетках.
Быводы, содержащиеся в вышедшей в 1953 г. работе Бринкманна [79], не подтверждают этих предположений. Так, исследуя с помощью электронного микроскопа ки шечные палочки, на которые действовали серебром, хло ром и озоном, Бринкманн не обнаружил никаких струк турных изменений в бактериях под влиянием серебра, тогда как хлор и озон вызывали такие нарушения.
В1955 г. Тонли и Вильсон [115] опубликовали работу,
вкоторой механизм действия серебра на клетку объясня ли нарушением ее осмотического равновесия.
Имеются данные, подтверждающие, что ионы сереб ра, связываясь нуклеиновым ядерным веществом, обра зуют нуклеинаты. Этим они нарушают жизнедеятельность бактерий; кислород же лишь тормозит рост последних. Температура воды также оказывает очень большое влия ние на эффективность бактерицидного действия ионов, что свидетельствует о значительной роли химических про цессов в этих явлениях.
Однако перечисленные исследования не раскрыва ют причин гибели микроорганизмов под влиянием се ребра.
Гуссо с сотрудниками [87] высказал предположение, что ионы серебра подобно адреналину каталитически влияют на ферментные системы. Такой же точки зрения
15
придерживаются Г. Н. Першин [49], Т. М. Турпаев [63] и др.
Большой вклад в решение проблемы антимикробного действия серебра внесли работы Вораца и Тоферна [78], которые объясняют олигодинамическое действие серебра выведением из строя ферментов, содержащих SH- и СООН-группы. Нормальный обмен веществ у бактерий осуществляется при помощи различных ферментов и фер ментных систем. Нарушение одного из ферментов приво дит к выключению функций всей системы.
Установлено, что ионы серебра связывают только те ферменты, которые имеют активные SH- и СООН-груп- пы. Блокирование активных групп ферментов вызывает изменение их функций, и в результате нарушения обме на веществ бактерии гибнут.
Впоследнее время в Секторе химии и технологии во ды Института коллоидной химии и химии воды АН УССР под руководством автора проводятся исследования по выяснению механизма бактерицидного действия электро литических растворов серебра и изучению их окислитель ного и каталитического действия.
Витоге выполненными уже работами показано [34], что электролитическая серебряная вода по сравнению с солями, коллоидными растворами и окисными соедине ниями серебра обладает наибольшей каталитической ак тивностью в реакции окисления индигокармина пере кисью водорода.
АНТИМИКРОБНЫЕ СВОЙСТВА СЕРЕБРА
Эффект уничтожения бактерий препаратами серебра чрезвычайно высокий. По данным В. А. Углова.[64], оц в 1750 раз сильнее действия карболовой кислоты в той же
16
а
Время контакта
б
Рис. 1. Сравнение бактерицидности различных дезинфицирующих препаратов на кишечной палочке (а) и бактерии Флекснера (6). Кон центрация реагента 1 мг)л, температура 7° С:
/ — серебряная вода; 2 — аммарген; 3 — фенол; 4 — хлор; 5 — хлорная и тесть.
2—63
концентрации и в 3,5 раза сильнее действия сулемы. По нашим данным, действие серебряной воды выше действия
хлора, |
хлорной извести, |
гипохлорита |
натрия |
и других |
|||||||||
|
|
|
|
|
сильных |
окислителей |
в |
||||||
|
|
|
|
|
одинаковых концентраци |
||||||||
|
|
|
|
|
ях (рис. 1). |
|
|
|
|
||||
|
|
|
|
|
По эффективности дей |
||||||||
|
|
|
|
|
ствия серебряной воды на |
||||||||
|
|
|
|
|
бактерии |
последние |
рас |
||||||
|
|
|
|
|
полагаются в такой ряд: |
||||||||
|
|
|
|
|
кишечные палочки<бак- |
||||||||
|
|
|
|
|
терии Флекснера<бак- |
||||||||
|
|
|
|
|
терии |
Эберта < стафило |
|||||||
|
|
|
|
|
кокки. |
|
|
|
отмирания |
||||
|
|
|
|
|
Кинетика |
||||||||
|
|
|
|
|
бактерий |
|
под |
влиянием |
|||||
Рис. 2. Кинетика отмирания Bad. |
серебра |
|
представлена |
на |
|||||||||
рис. |
2, |
Из |
приведенного |
||||||||||
coli под действием различной |
кон |
||||||||||||
|
центрации серебра: |
|
|
рисунка |
|
видно, |
что |
ско |
|||||
1 — 1,0; |
2 — 0,5; 3 — 0,2 |
и 4 — 0,05 |
мг/л. |
рость |
|
отмирания |
Bad. |
||||||
Исходное заражение — I04 особ/мл. |
|
coli зависит от применяе |
|||||||||||
ра. Так, при концентрации |
|
мой |
концентрации сереб |
||||||||||
1 мг/л гибель |
кишечной па |
||||||||||||
лочки |
наступает |
через |
3 мин, |
при |
концентрации |
||||||||
0,5 мг/л—через 20 мин, 0,2 мг/л—50 мин, |
а для концент |
||||||||||||
рации |
0,05 мг/л требуется |
около 2 часов |
контакта для |
||||||||||
полного бактерицидного |
эффекта. |
Интересно |
отметить, |
что начало антимикробного действия серебра также за висит от применяемой концентрации. Для дозы 0,05 мг/л это 5 мин, для 0,2—3 мин, для 0,5—2 мин. Действие се ребра при концентрации 1 мг/л и выше наступает с мо мента введения дезинфектантов.
В последнее время появились сообщения о том, что
18
очень важным санитарно-показательным микроорганиз мом наряду с кишечной палочкой является энтерококк. Сотрудниками Сектора химии и технологии воды Инсти тута коллоидной химии и химии воды АН УССР прово дились исследования по выяснению антимикробного дей ствия серебра на санитарно-показательные микроорга низмы.
В опытах по сравнению антимикробных свойств элек тролитических растворов серебра в отношении Bad. coli и Str. faecalis установлено, что Bad. coli более чувстви тельна к действию ионов серебра, чем Str. faecalis. Так, полная инактивация энтерококка (104 особ/л) наступает после 3—4 часов контакта с 0,2 мг/л серебра, а для угне тения Bad. coli в той же концентрации достаточно 1 часа контакта посевного материала с серебром.
В. С.' Брызгунов и др. [7] в своих работах показали, | что серебро обладает более высоким антимикробным эф фектом, чем пенициллин, биомицин и другие антибиоти ки, и оказывает губительное действие на антибиотико устойчивые штаммы бактерий.
Кроме перечисленных бактерий, под действием ионов серебра сравнительно быстро погибают возбудители ти фа, протеи [80], сальмонеллы, пигментные бактерии, ви брионы [109, ПО], возбудители дифтерии [88] и другие микроорганизмы.
При этом свежие, только что выделенные штаммы устойчивее старых лабораторных штаммов [89]. Серебро не убивает спорообразующие бактерии, но прорастание спор в присутствии ионов серебра задерживается [94].
По мнению некоторых исследователей (Либ, Крузе, Фишер и др.), на кислотоустойчивые, туберкулезные, а также сапрофитные водные бактерии серебро почти не действует.
19
Влитературе встречается указание на то, что грамотрицательные бактерии более чувствительны к серебру, - чем грамположительные. Крузе, Фишер [94] и другие ав торы указывают, что дрожжи и дрожжеподобные грибы слабо угнетаются серебром. На плесневые грибы серебро не действует [93, 103].
Имеются данные, свидетельствующие о том, что со противляемость действию серебра связана с содержани ем липидов в бактериальной клетке. Чем больше липи дов, тем сопротивляемость'бактерий выше [125].
Как правило, патогенные микроорганизмы более чув ствительны к серебру, чем сапрофиты. Циммерманн в своем литературном обзоре сообщает о том, что штаммы водных бактерий привыкают к серебру. Приводятся так же данные, согласно которым при известных малых кон центрациях серебро не только не вызывает гибели микро организмов, но очень часто даже стимулирует их рост
[76, 123].
В1919 г. при микроскопических исследованиях Заус
проследил отложение серебра в теле микроорганиз мов.
Различные бактерии фиксируют серебро в зависимо сти от своего размера. Так, дрожжи в разведении 1 : 105 могут накапливать до 4% серебра по отношению к их сухому весу.
Под влиянием серебра происходит изменение куль туральных и биохимических свойств кишечных бакте рий [5].
Вопрос о влиянии серебра на бактериофаг до настоя щего времени остается неясным. Так, по данным Брауне [78], даже высокие дозы серебра только весьма незначи
тельное время действуют |
на бактериофаг. |
Эберт, Ша- |
" пиро [83], Мегау, [99], Л. В. |
Григорьева [13, |
14] утвержда- |
20
ют, что серебро обладает активностью по отношению к бактериофагу. По данным Л. В. Григорьевой, серебро в концентрации 0,5 мг/л при температуре 37° и времени кон такта до 1—2 суток лишает бактериофаг жизнедеятель ности.
В то же время серебро оказывает сильное влияние на вирусы. По данным Липпельта [78], 1 мг/л серебра вызы вает полную инактивацию вирусов гриппа штаммов А ь В и Митрс-штамма за 30 сек.
А. В. Маселюк и О. С. Невкипилая [44] приводят бо лее высокую концентрацию серебра (10 мг/л), вызываю щую полное торможение РГА (реакции гемагглютинации) вирусов гриппа Аь ПАН, A2Sing, А265, Сендай, Apr_8 за 30 сек. Оказалось, что действие серебра на вирусы снижается с увеличением числа пассажей вирусов. Ими обнаружено также, что серебряная вода, приготовленная электролитическим способом, более активна, чем раствор азотнокислого серебра.
Поскольку бактерицидное действие серебра зависит от физико-химических услов.ий среды, разными исследо вателями при определении летальных доз серебра полу чены неодинаковые данные. Так, по данным Е. А. Плевако [51], водные растворы солей серебра убивают кишеч ные палочки в концентрации 109 особ/л через 24 ч при содержании в растворе всего 0,04 мг/л ионов серебра. Это соотношение величин относится к области биотиче ских воздействий малых количеств веществ, например гормонов, витаминов, микроэлементов.
Сотрудники Сектора химии и технологии воды Е. В. Сотникова и Г. Ю. Турчинович [22] изучили дейст вие электролитического серебра на водоросли, которые вызывали обрастание трубопроводов артезианского во допровода Киева и ухудшали органолептические свой-
21