Ультраструктуры бактериальной клетки: КЛЕТОЧНАЯ СТЕНКА
Картушевич Полина Денисовна 223 группа
Бактериальная клетка

Постоянные структуры:

• Клеточная стенка
• Цитоплазматическая мембрана
• Цитоплазма
• Рибосомы
• Мезосомы
• Нуклеоид

Непостоянные структуры – ЗАВИСЯТ ОТ УСЛОВИЙ СУЩЕСТВОВАНИЯ БАКТЕРИИ: Капсула, Жгутики, Споры, Включения, Пили, Плазмиды

По строению клеточной стенки прокариоты подразделяются на:
–грамположительные
–грамотрицательные

• Окрашивание бактерий по Граму – метод окраски, позволяющий разделить данную группу прокариотичеких микроорганизмов на грамотрицательные бактерии и грамположительные бактерии[2].
• Грамотрицательные и грамположительные бактерии отличаются строением клеточной стенки. Метод окрашивания бактерий по Граму был предложен в 1884 году датским ученым Х. Грамом[2]. К грамотрицательным бактериям, в частности, относятся кишечные палочки, сальмонеллы, бруцеллы, возбудители дизентерии, холеры, уксуснокислые бактерии, семейство Псевдомонадовые (Pseudomonadaceae).
• Основы и сущность метода Метод окрашивания бактерий по Граму основан на различной способности микроорганизмов удерживать в клетке красители трифенилметанового ряда – кристаллический фиолетовый или генциановый фиолетовый. Сущность метода основана на различии в химическом составе и строении клеточной стенки бактерий[2][1].
• Как уже было указано, все бактерии по этому признаку делят на две группы:
• грамположительные – красящиеся по Граму; грамотрицательные – не красящиеся по Граму[1].
• Техника окрашивания бактерий по Граму Методика поверки бактерий на окрашивание по Граму включает следующие операции: На обезжиренное предметное стекло наносят в трех местах три капли воды и готовят три тонких мазка различных видов бактерий. При этом по краям располагают контрольные мазки с заведомо известным отношением к окраске по Граму. В центре – мазок исследуемой культуры[1].
• Мазки высушивают и фиксируют в пламени спиртовки[1].
• Мазки окрашивают в течение одной минуты генцианвиолентом. Для этого на предметное стекло кладут полоску фильтровальной бумаги, пропитанной красителем, и смачивают ее водой[1].
• Бумажку с красителем удаляют, на препарат наносят раствор Люголя (водой промывать не надо) и выдерживают 60 секунд, до полного почернения мазка[1].
• Не промывая водой, препарат обрабатывают 96% спиртом в течение 15–20 с. При этом предметное стекло покачивают. Важно четко соблюдать указанное время обесцвечивания, поскольку при увеличении его продолжительности наблюдается обесцвечивание и грамположительных бактерий[1].
• Препарат промывают водой и накладывают на его поверхность полоску фильтровальной бумаги, пропитанной фуксином Пфейфера, смачивают ее водой и окрашивают в течение 60 секунд[1].
• Фильтровальную бумагу с красителем удаляют, препарат промывают водой и осушают чистой фильтровальной бумагой[1].
• На препарат наносят кедровое масло и рассматривают с иммерсионным объективом[1].
• После такой обработки грамположительные бактерии окрашиваются в фиолетовый или синий цвет, а грамотрицательные – в красный

---

• Все бактерии по отношению к окраске по Граму делятся на грамположительные - темно-фиолетового цвета и грамотрицательные - красного. Способность окрашиваться в тот или иной цвет зависит от строения их клеточной стенки и коррелирует со многими другими свойствами бактерий. У грамположительных бактерий в клеточной стенке отсутствуют ароматические и серосодержащие аминокислоты, отмечается низкое содержание липидов, у грамотрицательных, напротив, эти вещества содержатся в большом количестве. Кроме того, у грамположительных бактерий имеется магниевая соль рибонуклеиновой кислоты, отсутствующая у грамотрицательных. Она и образует прочный химический комплекс с белком, генцианвиолетом и йодом, который не разрушается при кратковременном действии спирта. У грамотрицательных такой комплекс не образуется. Они легко обесцвечиваются под действием спирта. Фуксин докрашивает грамотрицательные микроорганизмы в красный цвет.

Грамположительные бактерии

• В клеточной стенке грамположительных бактерий содержится небольшое количество полисахаридов, липидов и белков. Большую часть массы (40—90 %) клеточной стенки этих бактерий составляет пептидогликан (синонимы: муреин, мукопептид), ковалентно связанный с тейхоевыми кислотами (от греч. teichos — стенка).

Грамотрицательные бактерии

• В клеточной стенке грамотрицательных бактерий пептидогликана содержится меньше (5—10 %).
• В состав клеточной стенки грамотрицательных бактерий входит наружная мембрана, связанная посредством липопротеина с подлежащим слоем пептидогликана.

• Наружная мембрана имеет вид волнообразной трехслойной структуры Основной компонент этих мембран — бимолекуляр­ный (двойной) слой липидов.
• Наружная мембрана является асимметричной мозаичной структурой, представленной липополисахаридами, фосфолипидами и белками. С внешней стороны ее рас­положен липополисахарид (ЛПС), состоящий из трех компонентов: липида А, ядра и О-специфической цепи полисахарида.
• Липополисахарид «заякорен» в наружной мембране липидом А придающим токсичность липополисахариду, отождествляемому поэтому с эндотоксином.

• N. B.!!! Грамположительные (поддающиеся окраске) бактерии – СИНИЙ ЦВЕТ (по Граму). Их оболочка состоит из одного слоя, внешняя мембрана отсутствует. Грамотрицательные – КРАСНЫЙ ЦВЕТ (по Граму)
• Грамотрицательные бактерии имеют оболочку, не удерживающую краситель (после промывки стенка обесцвечивается). Их наружная оболочка намного тоньше, чем у грамположительных, при этом она имеет два слоя – наружную мембрану и располагающуюся под ней бактериальную стенку.
• СПОСОБЫ ОБНАРУЖЕНИЯ: электронная микроскопия, плазмолиз, метод Грама; можно разрушить клеточную стенку при помощи лизоцима

---

Необычные клеточные стенки прокариот

• Скользящие бактерии – клеточная стенка эластичная, позволяет менять форму клеток при движении.
• Архебактерии – клеточные стенки могут содержать: (не муреин)
–псевдомуреин;
–кислый гетерополисахарид;
–только белок (не окрашиваются по Граму).

Спасибо за внимание!

---

Смотрите также файлы

• Урок физической культуры в 4 А классе Студента Барабанова Александра Тема Подвижные игры Педагогическая цель.docx

• Магистерлік жобаны рылымы Отбасындаы атаанамен жеткіншіктер арасындаы атыыстарды туындауыны психологиялы себептері жне оларды алдын алу жолдары кіріспе.docx

• Магистрлік жобаны рылымы.doc

• Программа среднего профессионального образования 44. 02. 02 Преподавание в начальных классах Дисциплина Математика Практическое занятие 2.docx

• Формы безработицы в современной России.docx