Файл: 1. биопрепараты их применение при вирусных заболеваниях и принципы изготовления.docx
ВУЗ: Не указан
Категория: Не указан
Дисциплина: Не указана
Добавлен: 02.05.2024
Просмотров: 20
Скачиваний: 0
ВНИМАНИЕ! Если данный файл нарушает Ваши авторские права, то обязательно сообщите нам.
1.биопрепараты их применение при вирусных заболеваниях и принципы изготовления
Биопрепараты – средства биол. происхождения, применяемые для диагностики и профилактики инфекц. и инвазионных болезней, лечения животных и повышения их продуктивности.
Различают: лечебные (специфич. гипериммунные сыворотки и гамма–глобулины), профилактич. (вакцины, анатоксины), диагностич. (аллергены, антигены, диагностич. сыворотки, бактериофаги), стимулирующие средства (сыворотка крови животных, СЖК, препарат АСД, препарат витамина В12 и др.).
В ряде случаев лечебные Б. п. применяют в профилактич. целях, а стимулирующие средства – для лечения. Некоторые вет. Б. п, используются в мед. практике.
В Советском Союзе Б. п. готовили на специализированных биокомбинатах, биофабриках Гл. управления биол. пром–сти, а также во мн. Научно–исследовательских институтах и вет. лабораториях по единой для каждого препарата методике.
Контроль за изготовлением и выпуском Б. п. осуществляет ВГНКИ.- Всероссийский государственный центр качества и стандартизации лекарственных средств для животных и кормов.
Промышленное производство биопрепаратов представляет собой сложный комплекс взаимосвязанных физических, химических, биофизических, физико-химических процессов, и состоит из большого числа разнотипного оборудования, связанного между собой материальными, энергетическими потоками и образующих технологические линии. Характер этих связей может быть весьма разнообразным: продукты и полупродукты, вырабатываемые в одних аппаратах, поступают в следующие по ходу процесса аппараты; сырье и энергия распределяются между различными потребителями.
Приготовление противовирусных вакцин:- приготовление культуры клеток;- культивирование клеток; - культивирование вируса;- выделение и концентрирование вируса;- очистка вируса;- сорбирование;- инактивация вируса;
КЛАССИФИКАЦИЯ БИОПРЕПАРАТОВ
I. Биопрепараты, использующиеся in vivo:
Антигенные (вакцины /в т.ч. анатоксины/, аллергены, лизаты микробов для кожных проб), создающие активный иммунитет. Специфические АТ появляются в кровотоке примерно через 10 дней у здорового животного (у животных с иммунодифецитами – позже).
Антитело–содержащие (антисыворотки, гамма–глобулины, молозивные АТ, иммунное молоко), создающие за счет готовых АТ пассивный иммунитет. Однако «примеси» данных биопрепаратов и ксеногенные (лошадиные и пр.) АТ запускают активный «вредоносный» иммунитет. Поэтому использование желательно в течение 1 недели после первой инъекции. Антисыворотки вводят только по показаниям.
Иммунокорректоры – животного происхождения (цитомедины, интерлейкины, интерфероны, факторы роста, гормоны /глюкокортикоиды и др). – растительного происхождения (аллергены, лектины) – микробного происхождения (БЦЖ, продигиозан, антибиотики) – химические иммунокорректоры
II. Биопрепараты, использующиеся in vitro
Диагностикумы (для РНГА) антигенов микробов (самих клеток, лизатов, или очищенных Антигенов), использующиеся в серологических реакциях. Иммунодиагностикумы – это часто взвесь известных убитых микробов. Для инактивации используют высокую температуру, химические вещества (формалин, спирт, ацетон, фенол), ультразвук, ультрафиолетовые и рентгеновские лучи. При выделении из клеток различных Антигенов используют методы разрушения, экстракции, обработку ферментами и различными детергентами, центрифугирование.
Антигены, в т.ч. анатоксины /токсины/ для проведения РП, РН (для постановки контроля в серологии).
Диагностические антисыворотки. Для удаления из антисывороток группоспецифических антител в сыворотку последовательно добавляют микроорганизмы, в состав которых входят групповые антигены (метод Кастеллани). Таким образом получают адсорбированные сыворотки, которые содержат антитела к определенному виду микробов.
МАТ (мышиные антитела) для ИФА, иммуноблоттинга, ИФМ и пр. серологических реакций.
2.Современная классификация вирусов
Вирусы – это облигатные внутриклеточные паразиты, имеющие собственный геном, структурные белки и ферменты, способные репродуцироваться только в чувствительных к ним клетках животных, растений, бактериях.
В силу своих особенностей вирусы выделены в отдельныqпорядокViridales.
Порядок делится на семейства, которые подразделяются на подсемейства и роды. Вид– совокупность вирусов, имеющих почти идентичные геном (ДНК или РНК), свойства и способность вызывать определенный патологический процесс. Названия семейства имеют окончаниеviridae, подсемейство –virinae, рода –virus.
Признаки, используемые для классификации вирусов:
1) тип нуклеиновой кислоты – ДНК или РНК;
2) их структура (однонитевая, двунитевая, линейная, кольцевая, фрагментированная, нефрагментированная с повторяющимися и инвертированными последовательностями);
3) структура, размеры, тип симметрии, число капсомеров;
4) наличие или отсутствие внешней оболочки (суперкапсида);
5) антигенная структура;
6) феномены генетических взаимодействий;
7) круг восприимчивых хозяев;
8) географическое распространение;
9) внутриядерная или цитоплазматическая локализация;
10) чувствительность к эфиру и детергентам;
11) путь передачи инфекции.
3.Врожденный иммунитете ( естественный,видовой)
Иммуните́т — способность организма поддерживать свою биологическую индивидуальность путём распознавания и удаления чужеродных веществ и клеток. Врождённый иммунитет — способность организма обезвреживать чужеродный и потенциально опасный биоматериал (микроорганизмы, трансплантат, токсины, опухолевые клетки, клетки, инфицированные вирусом), существующая изначально, до первого попадания этого биоматериала в организм.
4.Методы культивирования вирусов.
Культивирование вирусов представляет собой их выращивание в искусственных условиях. Для этого культиваторы заражают животных, либо ткани и клетки. Проводят в целях диагностики, при проведении экспериментов, с целью изготовления противовирусных вакцин. Культивирование вируса впервые было совершено Гальтье в 1879 году. Он культивировал вирус бешенства, заразив мозг кролика вирусом бешенства, полученным у больной собаки.
Методы культивирования.
1. На лабораторных животных. Заражают животных (подкожно, внутримышечно, внутрибрюшино), которые чувствительны к определенным вирусам: хорьков - вирусом гриппа, кроликов - вирусом бешенства, обезьян - вирусом полиомиелита. Индикация_(обнаружение)'>Индикация (обнаружение)
вируса проводится по признакам заболевания. Недостаток метода - не все вирусы можно культивировать на животных, например, животные невосприимчивы к вирусам человека.
2. В куриных эмбрионах. Заражают куриный эмбрион (аллонтоисная полость, хорион-аллонтоисная оболочка, амниотическая полость, желточный мешок, сам эмбрион). Куриный эмбрион – очень удобен. Он защищен от попадания других микробов (стерильный), техника работы с ним проста, можно накопить большое количество вирусов. Индикация: а) по специфическим поражениям на хорион-аллантоисной оболочке, по гибели эмбриона, б) по реакции склеивания эритроцитов – реакции гемагглютинации (РГА). Недостатки метода: а)не все вирусы (вирус полиомиелита, вирус ящура) можно вырастить в куриных эмбрионах; б) невозможно обнаружить микроб без вскрытия эмбриона; в) в нем много загрязняющих белков и других соединений.
3. В тканевых культурах. Тканевые культуры или клеточные культуры – клетки, выращенные вне организма на искусственных питательных средах. Для их приготовления используют чаще всего эмбриональные и опухолевые ткани. Метод тканевых культур разработан Дж. Эндерсом в 50-е годы. Большинство вирусов способно размножаться в культурах клеток. Для каждого вируса можно подобрать наиболее чувствительную культуру клеток.
5. Характеристика сем.поксвирусов
В семейство Poxviridae, входят в роды Orthopoxvirus, Род Orthopoxvirus включает вирусы осповакцины и натуральной оспы, род Parapoxvirus – вирусы «узелков доярок» (псевдооспы рогатого скота), род Molluscipoxvirus – вирус контагиозного моллюска, род Yatapoxvirus – вирусы оспы обезьян.
Культивирование. Вирус культивируется в куриных эмбрионах, на хорионаллантоисной оболочке которых образуются белые вирусные бляшки; в первичных и перевиваемых культурах клеток, где дает характерно ЦПД в виде очаговой дегенерации клеточного пласта. Индикация вируса проводится в реакции гемагглютинации и гемадсорбции.
Устойчивость Поксвирусы выдерживают высушивание и сохраняют жизнеспособность в пат.материале в течение многих месяцев при комнатной температуре, в 50% растворе этанола инактивируются в течение 1 часа, в 50% растворе глицерина при 4°С сохраняются в течение нескольких лет, 1% фенол или 0,2% формальдегид при комнатной температуре инактивирует их только через 2 часа, 5% хлорамин – в течение 2 часов.
Источником инфекции являются больные люди в течение всего периода болезни. Инфекция передается воздушно – капельным и контактным путем..
Патогенез и клиника. Входные ворота – слизистая оболочка верхних дыхательных путей. Дерматропное действие вируса связано с его способностью проникать из крови в эпидермис, вызывать пролиферацию шиповидных клеток и дегенерацию клеток мальпигиева слоя.
Инкубационный период при натуральной оспе длится 8-18 дней, заболевание начинается остро, возникают головные боли, лихорадка, мышечные боли. Через 2-4 дня на слизистой оболочке полости рта и коже появляется характерная сыпь. В своем развитии сыпь проходит стадии папулы, пустулы, а затем образуется рубец.
Все элементы сыпи появляются одновременно и локализуются на лице и конечностях. С появлением сыпи температура снижается, а затем повышается, когда образуются пустулы. От момента появления сыпи до отпадения корочек проходит около трех недель. При классическом тяжелом течении болезни летальность достигает 40%, при легкой форме заболевания летальность не превышает 2%.
6. Сущность РСК и её применение в диагностике
Если в исследуемой сыворотке есть специфические антитела, то при добавлении известного антигена образуется комплекс Ат+Аг, который адсорбирует на своей поверхности свободный комплемент. В результате чего образуется комплекс Ат+Аг+комплемент.
При добавлении гемолитической системы, гемолиз эритроцитов не происходит, при этом в пробирке красная мутная жидкость, эритроциты находятся во взвешенном состоянии. Такая реакция положительная, следовательно животное больное.
Если в исследуемой сыворотке нет специфич. антител, то при добавлении антигена комплекса Аг+Ат не образуется и комплемент остаётся свободным. При добавлении гемолитической системы, происходит гемолиз эритроцитов, в пробирке красная прозрачная жидкость. Реакция отрицательная, следовательно животное здорово.
7. Типы вируса ящура и их диагностика
Ящур – остро протекающая высоко контагиозная болезнь парнокопытных, проявляющаяся лихорадкой, везикулярным поражением слизистых оболочек рта, кожи венчика и вымени. Болезнь регистрируется во всех странах мира.
Имеется большое количество типов вируса, 7 из которых вызывают заболевание. Они сходны по биологическим свойствам, но отличаются по антигенам, которые обозначают: О, А, С, САТ-1, САТ-2, САТ-3, Азия-1. Каждый тип имеет определенное число вариантов: тип А имеет 32 варианта, О - 13, С - 5, САТ-1 - 7, САТ-2 - 3, САТ-3 - 4, Азия-1 - 2. Типы и подтипы вируса различаются иммунологически: каждый из них может вызывать заболевание животного, иммунного к другим типам и вариантам вируса
