Файл: 1. биопрепараты их применение при вирусных заболеваниях и принципы изготовления.docx
ВУЗ: Не указан
Категория: Не указан
Дисциплина: Не указана
Добавлен: 02.05.2024
Просмотров: 21
Скачиваний: 0
ВНИМАНИЕ! Если данный файл нарушает Ваши авторские права, то обязательно сообщите нам.
Культивирование. Используюь подсвинков 3–4-месячного возраста, которых заражают любым способом. К вирусу чувствительны культуры лейкоцитов крови и макрофагов костного мозга свиней с развитием ГАД и ЦПД без адаптации. Антигенные свойства. Вирус содержит комплементсвязывающий, преципитирующий и гемадсорбирующий антигены, но не обладает иммуногенной активностью.. Патогенез. Вирус первоначально проникает в лимфоидную ткань и кровь, репродуцируется, распространяется по всему организму, вызывает генерализованную инфекцию с явлениями токсикоза. В результате возникают тяжелые сосудистые расстройства в виде множественных кровоизлияний, тромбозов сосудов, инфарктов и некрозов тканей, что приводит к массовой гибели заболевших животных.
Предубойная диагностика. Инкубационный период составляет 2–7 суток. различают молниеносное, острое, подострое и хроническое течение и латентную форму болезни. При молниеносном течении животные гибнут без характерных признаков; при остром повышается температура тела до 42,5°С, пропадает аппетит, Послеубойная диагностика. Многочисленные кровоизлияния на коже, слизистых и серозных оболочках. Лимфатические узлы увеличены. В грудной и брюшной полости экссудат Восприимчивы домашние и дикие свиньи всех возрастов. Источник возбудителя инфекции — больные животные. Факторы передачи вируса — корм, пастбища. Лабораторная диагностика. Диагноз ставят на основании анализа эпизоотологических данных, клинических признаков и патоло-гоанатомических изменений с обязательным проведением, особенно при первичном возникновении болезни, лабораторных исследований. Патологический материал: кровь, кусочки сердца, легких, печени, селезенки, почек и лимфатических узлов.
Схема лабораторной диагностики. I. Экспресс-метод: РИФ. II. Вирусологические исследования: 1) выделение вируса в культуре клеток лейкоцитов и костного мозга свиней, на подсвинках 2–4 месячного возраста; 2) идентификация выделенного вируса в РИФ, РСК, РДП, радиоиммунологический метод, метод рестрикционного анализа. III. Ретроспективная диагностика: РНИФ, РЗГАД, РДП, иммуноэлектрофорез, РИД, радиоиммунологический метод. Дифференциальный диагноз. Необходимо исключить КЧС, болезнь Ауески, пастерелез и рожу. Срок исследования — до 10 суток.
12. Интерференция, интерферон. Механизм действия интерферона.
Интерференция вирусов (; гибель, уничтожение_) антагонистическое, или ингибиторное, действие одного вируса или его компонентов на репродукцию другого вируса и течение инфекционного процесса, вызываемого последним. Первый вирус, обусловливающий феномен, называют интерферирующим, а второй — претендующим или интерферируемым. При одновременном введении вирусов возможна двусторонняя интерференция. Явление Интерференции вирусов используется при лабораторной диагностике и вакцинной профилактике некоторых вирусных инфекций. Так, вирусологические лаборатории применяют методы, основанные на интерференции, для обнаружения, выделения и титрования нецитопатогенных вирусов, а также антител к ним (напр., при выделении и изучении вируса краснухи). В практике иммунизации обнаружено положительное, обусловленное интерференцией, действие живых вирусных вакцин на заболеваемость, вызываемую как гомологичными, так и гетерологичными агентами. Однако феномен интерференции может играть и отрицательную роль при иммунизации, напр, наличие энтеровирусов в кишечнике человека уменьшает приживляемость вакцинных штаммов полиовируса и, следовательно, эффективность вакцинации. Кроме того, возможность проявления интерференции должна учитываться при составлении поливалентных вакцин, а также схем вакцинации.
ИФ-альфа, продуцируется лейкоцитами, противовирусным, антипролиферативным, противоопухолевым действием. Нарушает репродукцию вирусов, активируя в клетки ингибиторов релекации вируса.
ИФ-бэта, продуцируется фибробластами, противоопухолевым и противовирусным действием.
ИФ-гамма, продукт Т – хелперов, противовирусное действия. Влияет на рост клеток, активирует макрофаги, повышает продукцию ИЛ-1.
Интерферон относится к важным защитным белкам иммунной системы. Открыт при изучении интерференции вирусов, т. е. явления, когда животные или культуры клеток, инфицированные одним вирусом, становились нечувствительными к заражению другим вирусом. Оказалось, что интерференция обусловлена образующимся при этом белком, обладающим защитным противовирусным свойством. Этот белок назвали интерфероном.
Интерфероны : по структуре и биологическим свойствам интерфероны подразделяются на три вида: α-интерфероны β- интерфероны γ- интерфероны.
По способу получения выделяют: лейкоцитарные, лимфобластоидные и рекомбинантные интерфероны. Наиболее широко как противовирусные препараты используются рекомбинантные интерфероны альфа. По своему механизму действия и клинической эффективности наиболее схожи α-интерфероны и β-интерфероны.
Механизм действия интерферонов. Наиболее изученным свойством интерферона является его способность препятствовать размножению вирусов. Он образуется в клетках в ответ на вирусную инфекцию.
Интерфероны не обладают прямым противовирусным действием, они подавляют синтез вирусных белков и в некоторых случаях сборку и выход вирусных частиц путём активации олигоаденилатциклазы.
Все интерфероны обладают противовирусным, иммуномодулирующим, противоопухолевым и антипролиферативным эффектами. Помимо общих свойств, интерфероны обладаю рядом отличий.
Противовирусный эффект интерферонов заключается в подавление синтеза вирусной РНК, подавление синтеза белков оболочки вируса. Механизмом этого эффекта является активация внутриклеточных ферментов, таких например как протеинкиназа или аденилатсинтетаза. Протеинкиназа разрушает фактор инициации синтеза белка с матричной РНК, что подавляет белковый синтез. Аденилатсинтетаза – вызывает синтез веществ разрушающих вирусную РНК.
Иммуномодулирующий эффект интерферонов – способность регулировать взаимодействие клеток участвующих в иммунном ответе. Эту функцию интерфероны выполнят, регулируя чувствительность клеток к цитокинам и экспрессию на мембранах клеток молекул главного комплекса гистосовместимости I типа (ГКГ1). Усиление экспрессии ГКГ1 на вирус-инфицированных клетках значительно повышает вероятность того, что они будут распознаны иммунокомпетентными клетками и элеминированы из организма. Наиболее выраженными иммуномодулирующими свойствами обладает ИНФ-γ, являясь продуктом Т-лимфоцитов-хелперов I типа он вместе с другими провоспалительными цитокинами активирует макрофаги, Т-цитотоксические лимфоциты, клетки-естественные киллеры (NK-клетки), подавляет активность Влимфоцитов, активизирует простагландиновую и кортикостероидную системы. Все эти факторы усиливают фагоцитарные и цитотоксические реакции в зоне воспалительного очага и способствую эффективной элиминации инфекционного агента.
Противоопухолевый эффект интерферонов связан с их способностью замедлять или подавлять рост культуры клеток и активировать противоопухолевые механизмы иммунной системы.
13. Вирусные болезни птиц
Болезнь Ньюкасла птиц ( вирус семейства Paramyxoviridae) и классическая чума птиц вирус семейства Orthomyxoviridae) высоко контагиозные болезни птиц, сопровождающиеся высокой летальностью. Ввиду большого сходства клинических признаков, патологических изменений и эпизоотических данных обеих инфекций их точно дифференцировать можно только лабораторными методами. Необходимость типирования возбудителей этих болезней связана с особенностью их специфической профилактики.
производится путем:
– выделения возбудителя в развивающихся куриных эмбрионах;
– постановки биопробы на птицах;
– типирования выделенного вируса в реакциях задержки гемагглютинации, нейтрализации и связывания комплемента;
МЕТОДИКА ОБНАРУЖЕНИЯ
Исследуемый материал: больная птица или трупы не позднее двух часов с момента гибели. Из селезенки, или печени, легких, мозга, почек готовят 10%-ую суспензию на физ.растворе с соблюдением правил асептики .Делают навеску 1г., помещают ее в стерильную ступку и растирают снебольшим песка до получения гомогенной массы+ 9 мл физиологического раствора, содержащего 100 ед./мл тетрациклина и 1:10000 теомерсана (0,1 на 1000мл физраствора). Полученную массу переносят пипеткой в пробирку или пенициллиновый флакон.
Для освобождения взвеси от крупных частиц суспензию подвергают 15 минут центрифугированию при 3000 об/мин. Или отстаивают два часа при температуре от 0 до 40С.
В дальнейшее используем только надосадочную жидкость. Из полученной жидкости делают дополнительно разведение 1:1000 на физиологическом растворе. Исследуемым материалом в разведениях 1:10 и 1:1000 заражают по 6 куриных эмбрионов. Для заражения используют чистые куриные эмбрионы с белой скорлупой в возрасте 10 дней.
ПОСТАНОВКА БИОПРОБЫ
Проводят только в сомнительных случаях (при отсутствии клинических признаков и патологических изменений у птиц или при выделении вируса из гомогенатов исследуемых органов только в разведении 1:10). Биопробу проводят к болезни Ньюкасла или классической чуме птице того же возраста и породы, на которой установлено заболевание. Четырем птицам внутримышечно вводят 10%-ную суспензию исследуемых органов или аллантоисную вируссодержащую жидкость. За зараженной птицей устанавливают наблюдение в течение 10 дней. При наличии в исследуемом материале вирулентного вируса болезни Ньюкасла птица заболевает через 3-7 дней после заражения и погибает через 1-5 дней после начала заболевания, при классической чуме птица заболевает через 1-5 дней после заражения и погибает через 10-72 часа после появления клинических признаков заболевания. При отрицательном результате биопробы заражение птицы должны оставаться живыми. При гибели хотя бы одной из четырех зараженных птиц биопроба считается положительной
14. Вирусология как наука. Назначение и задачи вирусологии
Вирусология — наука о вирусах — микроскопических надмолекулярных созданиях природы, которые являются своеобразной паразитической формой жизни.
Общая вирусология изучает природу вирусов, их строение, размножение, биохимию, генетику. Медицинская, ветеринарная и сельскохозяйственная вирусология исследует патогенные вирусы, их инфекционные свойства, разрабатывает меры предупреждения, диагностики и лечения вызываемых ими заболеваний.
Вирусология решает фундаментальные и прикладные задачи и тесно связана с другими науками. Раздел вирусологии, изучающий наследственные свойства вирусов, тесно связан с молекулярной генетикой. Вирусы не только предмет изучения, но и инструмент молекулярно-генетических исследований, что связывает вирусологию с генетической инженерией. Вирусы — возбудители большого количества инфекционных заболеваний человека, животных, растений, насекомых. С этой точки зрения вирусология тесно связана с медициной, ветеринарией, фитопатологией и другими науками.
Назначение-изучает строение систематику, генетику размножение вирусов, их взаимодействие с клеткой
15. Болезнь Ауески. Диагностика и профилактика.
Болезнь Ауески (псевдобешенство, бешеная чесотка) — остропротекающая болезнь сельскохозяйственных животных всех видов, пушных зверей и грызунов.
Вирус относится к семейству Herpesviridae, содержит двуспиральный линейный ДНК-нуклеоид.
В составе вириона определено до 32 белков. Установлена роль отдельных белков в вирулентности и индукции иммунного ответа.
Антигенная активность. В оболочке вируса болезни Ауески различают 3 основных гликопротеина, на которые при инъекции свиньям образуются антитела. Их обнаруживают в PH, РСК и РДП. Комплементсвязывающие антитела появляются в сыворотке крови через 3 дня после заражения, и титр их удерживается до 30— 40 дней. Вируснейтрализующие антитела появляются на 5—7-й день, количество их достигает максимума через 3—4 нед, титр их сохраняется до 1,5 лет.
Антигенная вариабельность. Не установлена. Установлено антигенное родство вируса болезни Ауески с вирусом простого герпеса.
Предубойная диагностика. Инкубационный период составляет 2–7 суток. различают молниеносное, острое, подострое и хроническое течение и латентную форму болезни. При молниеносном течении животные гибнут без характерных признаков; при остром повышается температура тела до 42,5°С, пропадает аппетит, Послеубойная диагностика. Многочисленные кровоизлияния на коже, слизистых и серозных оболочках. Лимфатические узлы увеличены. В грудной и брюшной полости экссудат Восприимчивы домашние и дикие свиньи всех возрастов. Источник возбудителя инфекции — больные животные. Факторы передачи вируса — корм, пастбища. Лабораторная диагностика. Диагноз ставят на основании анализа эпизоотологических данных, клинических признаков и патоло-гоанатомических изменений с обязательным проведением, особенно при первичном возникновении болезни, лабораторных исследований. Патологический материал: кровь, кусочки сердца, легких, печени, селезенки, почек и лимфатических узлов.
Схема лабораторной диагностики. I. Экспресс-метод: РИФ. II. Вирусологические исследования: 1) выделение вируса в культуре клеток лейкоцитов и костного мозга свиней, на подсвинках 2–4 месячного возраста; 2) идентификация выделенного вируса в РИФ, РСК, РДП, радиоиммунологический метод, метод рестрикционного анализа. III. Ретроспективная диагностика: РНИФ, РЗГАД, РДП, иммуноэлектрофорез, РИД, радиоиммунологический метод. Дифференциальный диагноз. Необходимо исключить КЧС, болезнь Ауески, пастерелез и рожу. Срок исследования — до 10 суток.
12. Интерференция, интерферон. Механизм действия интерферона.
Интерференция вирусов (; гибель, уничтожение_) антагонистическое, или ингибиторное, действие одного вируса или его компонентов на репродукцию другого вируса и течение инфекционного процесса, вызываемого последним. Первый вирус, обусловливающий феномен, называют интерферирующим, а второй — претендующим или интерферируемым. При одновременном введении вирусов возможна двусторонняя интерференция. Явление Интерференции вирусов используется при лабораторной диагностике и вакцинной профилактике некоторых вирусных инфекций. Так, вирусологические лаборатории применяют методы, основанные на интерференции, для обнаружения, выделения и титрования нецитопатогенных вирусов, а также антител к ним (напр., при выделении и изучении вируса краснухи). В практике иммунизации обнаружено положительное, обусловленное интерференцией, действие живых вирусных вакцин на заболеваемость, вызываемую как гомологичными, так и гетерологичными агентами. Однако феномен интерференции может играть и отрицательную роль при иммунизации, напр, наличие энтеровирусов в кишечнике человека уменьшает приживляемость вакцинных штаммов полиовируса и, следовательно, эффективность вакцинации. Кроме того, возможность проявления интерференции должна учитываться при составлении поливалентных вакцин, а также схем вакцинации.
ИФ-альфа, продуцируется лейкоцитами, противовирусным, антипролиферативным, противоопухолевым действием. Нарушает репродукцию вирусов, активируя в клетки ингибиторов релекации вируса.
ИФ-бэта, продуцируется фибробластами, противоопухолевым и противовирусным действием.
ИФ-гамма, продукт Т – хелперов, противовирусное действия. Влияет на рост клеток, активирует макрофаги, повышает продукцию ИЛ-1.
Интерферон относится к важным защитным белкам иммунной системы. Открыт при изучении интерференции вирусов, т. е. явления, когда животные или культуры клеток, инфицированные одним вирусом, становились нечувствительными к заражению другим вирусом. Оказалось, что интерференция обусловлена образующимся при этом белком, обладающим защитным противовирусным свойством. Этот белок назвали интерфероном.
Интерфероны : по структуре и биологическим свойствам интерфероны подразделяются на три вида: α-интерфероны β- интерфероны γ- интерфероны.
По способу получения выделяют: лейкоцитарные, лимфобластоидные и рекомбинантные интерфероны. Наиболее широко как противовирусные препараты используются рекомбинантные интерфероны альфа. По своему механизму действия и клинической эффективности наиболее схожи α-интерфероны и β-интерфероны.
Механизм действия интерферонов. Наиболее изученным свойством интерферона является его способность препятствовать размножению вирусов. Он образуется в клетках в ответ на вирусную инфекцию.
Интерфероны не обладают прямым противовирусным действием, они подавляют синтез вирусных белков и в некоторых случаях сборку и выход вирусных частиц путём активации олигоаденилатциклазы.
Все интерфероны обладают противовирусным, иммуномодулирующим, противоопухолевым и антипролиферативным эффектами. Помимо общих свойств, интерфероны обладаю рядом отличий.
Противовирусный эффект интерферонов заключается в подавление синтеза вирусной РНК, подавление синтеза белков оболочки вируса. Механизмом этого эффекта является активация внутриклеточных ферментов, таких например как протеинкиназа или аденилатсинтетаза. Протеинкиназа разрушает фактор инициации синтеза белка с матричной РНК, что подавляет белковый синтез. Аденилатсинтетаза – вызывает синтез веществ разрушающих вирусную РНК.
Иммуномодулирующий эффект интерферонов – способность регулировать взаимодействие клеток участвующих в иммунном ответе. Эту функцию интерфероны выполнят, регулируя чувствительность клеток к цитокинам и экспрессию на мембранах клеток молекул главного комплекса гистосовместимости I типа (ГКГ1). Усиление экспрессии ГКГ1 на вирус-инфицированных клетках значительно повышает вероятность того, что они будут распознаны иммунокомпетентными клетками и элеминированы из организма. Наиболее выраженными иммуномодулирующими свойствами обладает ИНФ-γ, являясь продуктом Т-лимфоцитов-хелперов I типа он вместе с другими провоспалительными цитокинами активирует макрофаги, Т-цитотоксические лимфоциты, клетки-естественные киллеры (NK-клетки), подавляет активность Влимфоцитов, активизирует простагландиновую и кортикостероидную системы. Все эти факторы усиливают фагоцитарные и цитотоксические реакции в зоне воспалительного очага и способствую эффективной элиминации инфекционного агента.
Противоопухолевый эффект интерферонов связан с их способностью замедлять или подавлять рост культуры клеток и активировать противоопухолевые механизмы иммунной системы.
13. Вирусные болезни птиц
Болезнь Ньюкасла птиц ( вирус семейства Paramyxoviridae) и классическая чума птиц вирус семейства Orthomyxoviridae) высоко контагиозные болезни птиц, сопровождающиеся высокой летальностью. Ввиду большого сходства клинических признаков, патологических изменений и эпизоотических данных обеих инфекций их точно дифференцировать можно только лабораторными методами. Необходимость типирования возбудителей этих болезней связана с особенностью их специфической профилактики.
производится путем:
– выделения возбудителя в развивающихся куриных эмбрионах;
– постановки биопробы на птицах;
– типирования выделенного вируса в реакциях задержки гемагглютинации, нейтрализации и связывания комплемента;
МЕТОДИКА ОБНАРУЖЕНИЯ
Исследуемый материал: больная птица или трупы не позднее двух часов с момента гибели. Из селезенки, или печени, легких, мозга, почек готовят 10%-ую суспензию на физ.растворе с соблюдением правил асептики .Делают навеску 1г., помещают ее в стерильную ступку и растирают снебольшим песка до получения гомогенной массы+ 9 мл физиологического раствора, содержащего 100 ед./мл тетрациклина и 1:10000 теомерсана (0,1 на 1000мл физраствора). Полученную массу переносят пипеткой в пробирку или пенициллиновый флакон.
Для освобождения взвеси от крупных частиц суспензию подвергают 15 минут центрифугированию при 3000 об/мин. Или отстаивают два часа при температуре от 0 до 40С.
В дальнейшее используем только надосадочную жидкость. Из полученной жидкости делают дополнительно разведение 1:1000 на физиологическом растворе. Исследуемым материалом в разведениях 1:10 и 1:1000 заражают по 6 куриных эмбрионов. Для заражения используют чистые куриные эмбрионы с белой скорлупой в возрасте 10 дней.
ПОСТАНОВКА БИОПРОБЫ
Проводят только в сомнительных случаях (при отсутствии клинических признаков и патологических изменений у птиц или при выделении вируса из гомогенатов исследуемых органов только в разведении 1:10). Биопробу проводят к болезни Ньюкасла или классической чуме птице того же возраста и породы, на которой установлено заболевание. Четырем птицам внутримышечно вводят 10%-ную суспензию исследуемых органов или аллантоисную вируссодержащую жидкость. За зараженной птицей устанавливают наблюдение в течение 10 дней. При наличии в исследуемом материале вирулентного вируса болезни Ньюкасла птица заболевает через 3-7 дней после заражения и погибает через 1-5 дней после начала заболевания, при классической чуме птица заболевает через 1-5 дней после заражения и погибает через 10-72 часа после появления клинических признаков заболевания. При отрицательном результате биопробы заражение птицы должны оставаться живыми. При гибели хотя бы одной из четырех зараженных птиц биопроба считается положительной
14. Вирусология как наука. Назначение и задачи вирусологии
Вирусология — наука о вирусах — микроскопических надмолекулярных созданиях природы, которые являются своеобразной паразитической формой жизни.
Общая вирусология изучает природу вирусов, их строение, размножение, биохимию, генетику. Медицинская, ветеринарная и сельскохозяйственная вирусология исследует патогенные вирусы, их инфекционные свойства, разрабатывает меры предупреждения, диагностики и лечения вызываемых ими заболеваний.
Вирусология решает фундаментальные и прикладные задачи и тесно связана с другими науками. Раздел вирусологии, изучающий наследственные свойства вирусов, тесно связан с молекулярной генетикой. Вирусы не только предмет изучения, но и инструмент молекулярно-генетических исследований, что связывает вирусологию с генетической инженерией. Вирусы — возбудители большого количества инфекционных заболеваний человека, животных, растений, насекомых. С этой точки зрения вирусология тесно связана с медициной, ветеринарией, фитопатологией и другими науками.
Назначение-изучает строение систематику, генетику размножение вирусов, их взаимодействие с клеткой
15. Болезнь Ауески. Диагностика и профилактика.
Болезнь Ауески (псевдобешенство, бешеная чесотка) — остропротекающая болезнь сельскохозяйственных животных всех видов, пушных зверей и грызунов.
Вирус относится к семейству Herpesviridae, содержит двуспиральный линейный ДНК-нуклеоид.
В составе вириона определено до 32 белков. Установлена роль отдельных белков в вирулентности и индукции иммунного ответа.
Антигенная активность. В оболочке вируса болезни Ауески различают 3 основных гликопротеина, на которые при инъекции свиньям образуются антитела. Их обнаруживают в PH, РСК и РДП. Комплементсвязывающие антитела появляются в сыворотке крови через 3 дня после заражения, и титр их удерживается до 30— 40 дней. Вируснейтрализующие антитела появляются на 5—7-й день, количество их достигает максимума через 3—4 нед, титр их сохраняется до 1,5 лет.
Антигенная вариабельность. Не установлена. Установлено антигенное родство вируса болезни Ауески с вирусом простого герпеса.
