Файл: Иваницкий Г.Р. Исследование микроструктуры объектов методами когерентной оптики.pdf

ВУЗ: Не указан

Категория: Не указан

Дисциплина: Не указана

Добавлен: 22.06.2024

Просмотров: 53

Скачиваний: 0

ВНИМАНИЕ! Если данный файл нарушает Ваши авторские права, то обязательно сообщите нам.

о

100 А (при использовании излучения с длиной волны

1А).

Вголографической рентгеновской микроскопии диф­ ракционное изображение регистрируется совместно с

эталонной волной. Голограмма восстанавливается в види-

Рпс. 42.

Метод

рентгеновском

голографии

с использованием

зеркала Ллойда.

 

I — круглая

диафрагма;

2 - - рентгеновский источник;

3 — образец;

-/ — зеркало;

5 — плоскости

голограммы.

мом свете, п может быть получено четкое сфокусирован­ ное изображение. При этом желательно достижение мак­ симального увеличения на первой стадии (при фиксации голограммы), так как это понижает пространственные частоты регистрируемых полос. Такое решение выгодно по двум причинам: во-первых, из-за ограниченного раз­ решения регистрирующей среды и, во-вторых, из-за того, что реконструирующее излучение обладает большой дли­ ной волны и может не обеспечить разрешения тонкой интерференционной структуры, даже если пленка ее вос­ произведет.

Существует несколько методов синтеза голограмм в рентгеновском диапазоне [Л. 133]. Один из них (рис. 42) предполагает использование зеркала Ллойда. Излуче­ ние от пекогерентного источника проходит через круг­ лую диафрагму и затем через объект. Часть прошедшего луча падает на рентгеновское зеркало почти параллель­ но его поверхности п испытывает полное наружное отра­ жение. В плоскости голограммы происходит наложение прошедшего и отраженного излучений. Минимальное рас­ стояние, разрешаемое при таком методе синтеза голо­ грамм, порядка

dmw~hlac,

(2-1 В)

133


где ас — критический угол полного наружного отражения

о

на рентгеновском зеркале. При 1=1 А и ас=20' =

= 0,006 рад dmiu = 150 А.

Применяются и другие способы создания опорной волны. Возможно размещение точечной диафрагмы, со­ здающей опорную волну, в одной плоскости с объектом. О некоторых преимуществах безлпнзовой Фурье-голо- графии (разрабатывавшейся именно для целей рентге­ новской микроскопии) уже упоминалось выше. Предел разрешения в этом случае обратно пропорционален раз­ меру диафрагмы. Однако периоды интерференционных полос на голограмме, регистрируемых фотоматериалом с определенным уровнем контраста, должны соответство­ вать минимальному расстоянию между объектом и эта­ лонной диафрагмой всего в несколько микрометров. Да­ же при диафрагме в 10 мкм, изготовление которой уже достаточно трудоемко, такое расстояние обеспечить за­ труднительно. Поэтому в настоящее время исследуется возможность замены эталонного источника объектом мо­ лекулярных размеров с известной структурой [Л. 119].

Рентгеновская голографическая микроскопия сулит чрезвычайно высокое разрешение (порядка нескольких ангстрем), приближающееся к разрешению электронного микроскопа, но в отличие от последнего не требует ваку­ ума и не нагревает образец.

Развитие рентгеновской голографической микроско­ пии тормозится отсутствием в настоящее время когерент­ ных излучателей в этом диапазоне.

Визуализация микрообъектов может натолкнуться на существенные трудности из-за некоторых ограничиваю­ щих условий. К ним относится необходимость минималь­ ных повреждений структуры, что очень важно в случае прижизненных исследований биологических объектов. В то же время интенсивные лучевые нагрузки могут вы­ звать необратимые изменения в структуре и, следова­ тельно, недопустимы.

Голография в этом случае позволяет ограничить воз­ действие лучевой энергии на препарат лишь временем, необходимым для экспозиции голограммы. Все после­ дующие исследования могут производиться с волновым фронтом, восстановленным с голограммы. Сохранение амплитудных п фазовых соотношений дает возможность исследовать восстановленный волновой фронт всеми до-

134

турах. Таким путем, например, может производиться анализ движущейся крови (Л. 45].

Пространственная организация молекулярных струк­ тур чрезвычайно важна для понимания основных био­ логических процессов. Некоторые приемы голографии могут быть использованы для восстановления трехмер­ ных молекулярных структур.

Успехи в развитии микроскопических исследований в последнее время связываются с широким использова­ нием количественных методов оценки состояния струк­ туры. Получение же статистически достоверных резуль­ татов связано с необходимостью оперативной обработки больших массивов экспериментальных данных. Методы голографии могут быть полезны и здесь.

Синтез оптико-цифровых комбинированных систем по­ зволяет автоматизировать получение и статистическую обработку обширных объемов микроскопической инфор­ мации с целью автоматического счета, измерения пара­ метров, диагностирования ситуаций. В частности, авто­ матическое обнаружение различных форм биологических объектов может вестись с использованием методов дву­ мерной согласованной фильтрации [Л. 37]. Оптимальное построение такой системы обнаружения должно учиты­ вать статистическую природу микроскопических изобра­ жений (гл. 3).


СП И С О К Л И Т Е Р А Т У Р Ы

I.Баренбойм Г. М., Доманский А. Н., Туроверов К. К. Люми­

несценция биополимеров и клеток. М., «Наука», 1966, 233 с.

у 2. Белькевич В. И. Выбор приемов счета микроскопических

объектов.— В км.: Машинный анализ микроскопических объектов.

М„ «Наука», 1968. 123 с.

3.Бобринев В. И. и др. Исследование разрешающей способности

фотоматериалов, применяемых в голографии.— «Ж НпПФиК», 1969,

5.

У4. Богданов К. М. и др. Установка для анализа микроструктур по их статистическим характеристикам.— В ки.: Машинный анализ микроскопических объектов. М., «Наука», 1968. 123 с.

5.Боде Г., Шеннон К. Упрощенное изложение линейной мини­ мально-квадратичной теории сглаживания и предсказания.— В кн.:

Теория информации и ее приложения. Под ред. А. А. Харкевича. М., Изд-во иностр. лит., 1959. 328 с.

6. Буркхарт С. Информативная емкость оптических простран­ ственных фильтоов для распознавания знаков.— «Зарубежная радио­ электроника», 1969, № 9.

7. Вайнштейн Л. А., Зубаков В. Д. Выделение сигналов на фоне

случайных помех. М.. «Советское

радио», 1960. 447 с.

8. Вандер Лю гт А. Формулы

для анализа и расчета систем оп­

тической обработки информации. ТИИЭР, 1966, т. 54, № 8, с. 43— 51.

9.

Ван де Хюлст

Г. Рассеяние света малыми

частицами.

М.,

Изд-во иностр. лит., 1961, 476 с.

 

 

10.

Вентцель Е.

С. Теория вероятностей. М.,

«Наука»,

1969.

576с.

II. Волошин Г. Я. Некоторые свойства многомерных спектров. Вычислительные системы.— «Труды Института математики СО АН

СССР». Новосибирск. 1965, вып. 19.

12. Вудворд Ф. М. Теория вероятностей и теория информации

сприложением в радиолокации. М., «Советское радио», 1955. 128 с.

13.Габор Д. Микроскопия па основе метода восстановления волнового фронта. Перевод в книге Д ж . Строука «Введение в коге­ рентную оптику и голографию». М., «Мир», 1967.

14.Гарсиа А., Иорио Р. Возможные источники ошибок в двухволповой цитофотометрии.— ■ В ки.: Введение в количественную цито­ химию. М., «Мир», 1969. 439 с.

15.Герман С. Влияние эффекта затенения на переходную ха­

рактеристику оптического устройства. ТИИЭР, 1969, № 3.

16. Герман С. Динамический диапазон запоминающих устройств

на фотохромпой пленке.

ТИИЭР, 1968, № 3.

 

 

17.

Гоноровский И.

С. Радиотехнические

цепи

и сигналы. М.,

«Советское радио», 1971. 695 с.

 

 

18.

Горелик Г. С. Колебания и волны. М.,

Фнзматгнз, 1959.572 с.

19.

Давенпорт В. Б., Джонсон Р. А., Миддлтон

Д. Статистиче­

ские ошибки при измерении случайных функций времени.— В кн.: Определение параметров случайных процессов. Пер. с англ, под ред. В. И. Чайковского. Гостехиздат УССР, 1962. 168 с.

20. Дейч А. Цитофотометрия нуклеиновых кислот.— В кн.: Вве­ дение в количественную цитохимию. Пер. с англ, под ред. В. Я. Брод­ ского. М ., «Мир», 1969. 439 с.

21. Джеймс Т., Хиггинс Дж. Основы теории фотографического процесса. М., Изд-во иностр. лит., 1954. 280 с.

137


22. Днтчберн Р. Физическая оптика. М.„ «Наука», 1965. 631 с.

23.Евреикова Т. Н., Галимова Л. М. Применение анализатора микрообъектов для измерения модельных белковых, нуклеиновых, углеводных коацерватных капель.— В кн.: Машшшый анализ мик­ роскопических объектов. М., «Наука», 1968. 123 с . '

24.Емельянов В. Б., Печатников В. А. Дифракционный метод

исследования перестройки поперечной полосатостп одиночного мы­

шечного волокна при сокращении.— В кн.:

Биофизика

живой клет­

ки. Под ред. Г. М. Франк. Пущино, Нзд-во

АН СССР,

1970, вып. 1.

с. 108—

113.

 

 

25.

Емельянов В. Б. и др. Определение геометрии биологических

частиц методом светорассеяния. № 3069-71.

В И Н И ТИ ,

1971.

26.

Зоммерфельд А. Оптика. М., Изд-во

нностр. лит., 1953, 487 с.

27.

Иваницкий Г. Р., Литннская Л. Л.,

Шихматова

В. Л. Авто­

матический анализ мпкрообъектов. М., «Энергия», 1967. 224 с.

28. Иваницкий Г. Р., Гартштейн В. П., Дудаев Н. А. О влиянии подготовки препарата на точность машинного анализа биострук­ тур.— В кн.: Методы сбора и анализа информации в физиологии

имедицине. М „ «Наука», 1971. 319 с.

29.Иваницкий Г. Р., Шмаков А. К. Методы статистического анализа однородных многослойных биологических структур.— В кн.: Методы и техника машинного анализа бноструктур. М., «Наука», 1972, с. 31— 54.

30.Ивенс X. Повреждения хромосом ионизирующими излучени­ ями. М., Атомиздат, 1966. 96 с.

31. Кассирский И. А., Алексеев Г. А. Клиническая гематология.

М., Медгиз, 1955. 800 с.

32.Катрона Л. и др. Оптические системы фильтрации и обра­ ботки сигналов.— «Зарубежная радиоэлектроника», 1962, № 10. Авт.: Катрона Л., Лейф Э., Палермо С., Парчелло Л.

33.Козлов Б. Л., Каминир Г. И., Куниский А. С. Телевизионный микроскоп для исследования бноструктур в области 248— 700 нм.— «ПТЭ», 1966, № 4.

34.Константинов Б. П. и др. Фотографирование в когерентном свете. Экспериментальная техника и разрешающая способность ме­ тода.— «ЖТФ», 1966, т. 36, № 1718. Авт.: Константинов Б. П., Зайдель А. Н., Константинов В. Б., Островский Ю. И.

35.Королев Н. В., Левин С. В. О микроскопическом изучении

живых биологических объектов при темиопольном освещении.— «Ци­ тология», 1968, т. 5, № 5, с. 588— 591.

36.Котельников В. А. Теория потенциальной помехоустойчиво­ сти. М., Госэнергоиздат, 1958. 151 с.

37.Куниский А. С., Дубров А. П. Использование двумерной согласованной фильтрации для автоматического анализа хромосом­

ных нарушений в клетках животных и растений. Д А Н СССР, 1969, т. 188, № 2 .

38. Куниский А. С. О двумерной фильтрации микроскопических изображений.— В кн.: Современные проблемы машинного анализа-у биологических структур. М., «Наука», 1970, 190 с. ~ -

39. Куниский А. С. Влияние морфологической изменчивости на процесс обнаружения биологических микрообъектов методами дву­ мерной согласованной фильтрации. — В кн.: Методы и техника ма­ шинного анализа биологических структур. М., «Наука», 1972, 135 с.

138