Файл: Учебнометодическое пособие по организации внеаудиторной самостоятельной работы обучающихся по основной профессиональной образовательной программе высшего образования.pdf

федеральное государственное бюджетное образовательное
учреждение высшего образования
«Кемеровский государственный медицинский университет»
Министерство здравоохранения Российской Федерации
Кафедра микробиологии,
иммунологии и вирусологии
Леванова Л. А., Отдушкина Л. Ю.
МЕДИЦИНСКАЯ МИКРОБИОЛОГИЯ
Учебно-методическое пособие по организации внеаудиторной самостоятельной работы обучающихся по основной профессиональной образовательной программе высшего образования
– программе специалитета по специальности 31.05.03
«Стоматология»
Кемерово 2021
1

УДК [61+579.2](075.8)
ББК 52.64я73
Л 342
Леванова, Л. А. Медицинская микробиология : учебно-методическое пособие по
организации внеаудиторной самостоятельной работы обучающихся по основной
профессиональной образовательной программе высшего образования
– программе
специалитета по специальности 31.05.03 «Стоматология» /Л. А.
Леванова, Л. Ю.
Отдушкина. – Кемерово, 2021. – 100 с.
Учебно-методическое пособие предназначено для организации внеаудиторной самостоятельной работы студентов по дисциплине «Микробиология, вирусология –
микробиология полости рта» с целью освоения базисных знаний и приобретения практических навыков
Учебно-методическое пособие предназначено для организации внеаудиторной самостоятельной работы студентов по основной профессиональной образовательной программе высшего образования – программе специалитета по направлению подготовки
«Стоматология».
Коллектив а второв:
Леванова Людмила Александровна – док. мед. наук, доц., заведующая кафедрой микробиологии, иммунологии и вирусологии ФГБОУ ВО КемГМУ Минздрава России.
Отдушкина Лариса Юрьевна – асс. кафедры микробиологии, иммунологии и вирусологии
ФГБОУ ВО
КемГМУ
Минздрава России;
Рецензенты:
Даниленко Алексей Николаевич – канд. мед. наук, доц. кафедры терапевтической стоматологии ФГБОУ ВО
КемГМУ
Минздрава России;
Кувшинов Дмитрий Юрьевич – д-р. мед. наук, зав. кафедрой нормальной физиологии
ФГБОУ ВО КемГМУ Минздрава России.
Рекомендовано Центральным методическим советом Кемеровского государственного
медицинского университета в качестве учебно-методического пособия по организации
аудиторной работы
для обучающихся
по основной профессиональной образовательной
программе высшего образования – программе специалитета по специальности 31.05.03
Стоматология,
протокол № 1 от 26 октября 2021 г.
ФГБОУ ВО КемГМУ Минздрава России, 2021
2

ОГЛАВЛЕНИЕ
ПРЕДИСЛОВИЕ……………………………………………………………………………….
4
РАЗДЕЛ 1. МОРФОЛОГИЯ И КЛАССИФИКАЦИЯ МИКРООРГАНИЗМОВ
Занятие №1. Тема 1. Классификация и морфология бактерий. Методы микробиологической диагностики …………………………………………………………….
5
Занятие №2. Тема 2. Ультраструктура бактериальной клетки ……………………………….
14
РАЗДЕЛ 2. ФИЗИОЛОГИЯ МИКРОБОВ. УЧЕНИЕ ОБ ИНФЕКЦИИ
Занятие №3. Тема 1.
Физиология бактерий. Бактериологический метод исследования..…..
24
Занятие №4. Тема 2.
Идентификация бактерий по культуральным и биохимическим свойствам ………………………………………………………………………………………...
30
РАЗДЕЛ 4. ЭКОЛОГИЯ МИКРОБОВ. УЧЕНИЕ ОБ ИНФЕКЦИИ
Занятие №5. Тема 1. Учение об инфекции. Патогенность и вирулентность ………………..
37
Занятие №6. Тема 2.
Антагонизм микробов. Антибиотики, методы определения чувствительности микробов к антибиотикам. Асептика, антисептика.……………………..
41
РАЗДЕЛ 5. ИММУНОДИАГНОСТИЧЕСКИЕ РЕАКЦИИ.
Занятие №7. Тема 1.
Серологический метод исследования. Двухкомпонентные СР..…….
45
Занятие №8. Тема 2.
Серологический метод исследования. Многокомпонентные СР……..
49
РАЗДЕЛ 6. БИОЛОГИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ СПИРОХЕТ, РИККЕТСИЙ,
ХЛАМИДИЙ, МИКОПЛАЗМ И ЛЕГИОНЕЛЛ
Занятие №9. Тема 1. Патогенные спирохеты и спирохетозы…………………………………
53
Занятие №10. Тема 2. Бактерии – внутриклеточные паразиты ………………………………
56
РАЗДЕЛ 7. ЧАСТНАЯ МИКРОБИОЛОГИЯ
Занятие №11. Тема 1. Пиогенные кокки………………………………………………………
62
Занятие №12. Тема 2. Патогенные и условно-патогенные микобактерии. Дифтерия …….
66
Занятие 13. Тема 3. Возбудители ООИ………………………………………………………..
71
РАЗДЕЛ 8. ОБЩАЯ И ЧАСТНАЯ ВИРУСОЛОГИЯ
Занятие №14. Тема 1. Неклеточные формы жизни, прионы, вироиды ……………………..
75
Занятие №15. Тема 2. Респираторные вирусы ………………………………………………..
76
Занятие №16. Тема 3. Энтеровирусы. Герпесвирусы ………………………………………..
80
Занятие №17. Тема 4. Гепатотропные вирусы ……………………………………………….
84
РАЗДЕЛ 9. МИКРОБИОЛОГИЯ ПОЛОСТИ РТА
Занятие №18. Тема 1. Микробиоценоз полости рта. Микрофлора при кариесе зубов …….
89
Занятие №19. Тема 2. Микрофлора здорового пародонта и при пародонтитах……………..
91
Занятие №20. Тема 3. Микозы полости рта ……………………………………………………
93
Занятие №21. Итоговый контроль (коллоквиум) по микробиологии полости рта ………..
96
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ ………………...............................................................................
99 3

ПРЕДИСЛОВИЕ
Данное учебно-методическое пособие составлено для внеаудиторной самостоятельной работы студентов по дисциплине «Микробиология,
вирусология – микробиология полости рта», подготовленное соответствии с действующим ФГОС ВО по направлению подготовки 31.05.03 «Стоматология»,
утвержденным приказом Минобрнауки России
№984 от «12» августа 2020 г
(рег. В Министерстве юстиции РФ №59473 от 26.08.2021 г.) Оно представляет собой комплекс вопросов для группового теоретического разбора и практических симуляционных заданий, позволяющих частично сформировать компетенции ОПК-6, ОПК-9, ОПК-5, предусмотренные ФГОС ВО по направлению подготовки 31.05.03 «Стоматология», утвержденным приказом
Минобрнауки России
№984 от «12» августа 2020 г (рег. В Министерстве юстиции РФ №59473 от 26.08.2021 г.)
Так же в учебно-методическом пособии указываются «конечные точки» практического занятия, т.е. конкретно, какие навыки и умения студент должен приобрести или сформировать на занятии.
4

РАЗДЕЛ 1. МОРФОЛОГИЯ И КЛАССИФКАЦИЯ
МИКРООРГАНИЗМОВ.
Занятие №1. Тема 1. КЛАССИФИКАЦИЯ И МОРФОЛОГИЯ БАКТЕРИЙ.
МЕТОДЫ МИКРОБИОЛОГИЧЕСКОЙ ДИАГНОСТИКИ
Компетенции, частично формируемые на занятии: ОПК-5, ОПК-9.
Цель изучения темы: Научиться соблюдать правила противоэпидемического режима и техники безопасности в бактериологической лаборатории. Освоить микроскопический метод диагностики,
сформировать знания о морфологических формах бактерий.
Задачи:
1. вспомнить устройство микроскопов, ход пучка через систему линз.
2. изучить этапы приготовления мазка и технику иммерсионной микроскопии.
Задания для самостоятельной внеаудиторной работы студентов по данной
теме:
1) Подпишите основные морфологические группы бактерий (приложение 1)
2) Ознакомиться с теоретическим материалом по теме занятия с использованием рекомендуемой учебной литературы, лекционного материала,
приложениями методического указания к данной теме.
2) Ответить на вопросы для самоконтроля:
1.Предмет и задачи медицинской микробиологии.
2.Оснащение и режим работы бактериологической лаборатории.
3. Микроскопический метод исследования, значение, преимущество и недостатки. Устройство микроскопа и методы микроскопии (приложение 2, 3).
4. Техника и этапы приготовления мазка для микроскопии (приложение 4).
5.Основные формы бактерий и их представители
5

Правила для студентов,
работающих в бактериологической лаборатории
на кафедре микробиологии, иммунологии и вирусологии
Работа на кафедре микробиологии, иммунологии и вирусологии в учебных бактериологических лабораториях требует строгого соблюдения правил, так как исследования проводятся с использованием культур патогенных и условно-патогенных микроорганизмов (III и IV группа патогенности).
Соблюдение этих правил необходимо для обеспечения как личной безопасности, так и безопасности окружающих.
I. До начала работы проверить состояние рабочего места и микроскопа; сообщить о недостатках дежурному и устранить их.
II. Во время работы:
1) не разбрасывать по столу лабораторные принадлежности (пробирки, бактериологическая петля, краски, иммерсионное масло и т. д.);
2) экономно расходовать краски и спирт; по окончании работы сразу же гасить спиртовку;
3) во время посевов не разговаривать и не ходить по лаборатории;
4) на всех пробирках и чашках с посевами написать свой рабочий номер.
III. По окончании занятия:
1) сдать дежурным методическое пособие, посевы и полученный инструментарий;
2) произвести тщательную уборку микроскопа и поставить егo в шкаф для микроскопов;
3) привести в порядок рабочее место; вытереть стол тряпкой, смоченной дезинфицирующим раствором; выключить свет.
4) подписать у преподавателя протокол работы;
5) перед уходом из лаборатории вымыть руки; при необходимости, обработать дезинфицирующим раствором.
В бактериологической лаборатории ВОСПРЕЩАЕТСЯ:
1) находиться без халата и маски;
2) принимать пищу и курить;
3) класть на столы портфели и сумки;
6

Приложение 1
Подпишите основные морфологические группы микроорганизмов:
1.
; 2. ; 3.
;
4. ; 5. ; 6.
;
7. ; 8 ; 9
;
10. ; 11. ; 12.
7

Приложение 2
ОСНОВНЫЕ МЕТОДЫ МИКРОБИОЛОГИЧЕСКОЙ ТЕХНИКИ
В микробиологической лаборатории производятся следующие виды исследований:
1. Бактериоскопическое – изучение микроорганизмов под микроскопом.
2. Бактериологическое – изучение микроорганизмов методом культивирования (выращивания) на искусственных питательных средах.
3. Биологическое (экспериментальное) – определение микроорганизмов или их токсинов методом заражение лабораторных животных.
4. Серологическое – метод определения титра антител в сыворотке больного.
Микроскоп (от греческого слова micros – малый и scopeo – смотрю) служит для изучения малых объектов, невидимых простым глазом.
Рис. 1. Микроскоп МБИ-1:
1 — окуляр;
2 — тубус наклонный;
3 — тубусодержатель;
4 — объектив;
5 — предметный столик;
6 — конденсор;
7 — зеркала;
8 — револьвер на салазках;
9 — ножка-башмак
В микроскопе различают механическую и оптическую часть (рис. 1)
МЕХАНИЧЕСКАЯ ЧАСТЬ
-
 Штатив, в котором различают нижнюю часть, или ножку (9), и верхнюю часть, или тубусодержатель (3).
 Предметный столик (5), на котором помещается исследуемый объект.
 Тубус (2) – подвижная трубка, к которой прикрепляются линзы, служащие для увеличения исследуемого объекта.
 Макрометрический винт – служит для первоначальной грубой наводки.
8

 Микрометрический винт – служит для более точной установки, один поворот которого передвигает тубус на 0,1 мм.
 Револьвер (8) – позволяет установить необходимый объектив.
ОПТИЧЕСКАЯ ЧАСТЬ
–
 Окуляр (1) – служит для увеличения не исследуемого предмета, а только его изображения, имеет 2 линзы: верхняя – глазная, нижняя – собирательная. На окулярах имеются цифры, обозначающие даваемое увеличение (7, 8, 10,15)
 Объективы (4) – представляют собой систему двояковыпуклых линз,
заключенных в металлическую оправу. На оправе объективов указывается даваемое ими увеличение (8,10, 20,40, 60, 90). Различают два типа объективов:
сухие и иммерсионные (погружные). При исследовании микроорганизмов применяется исключительно иммерсионная система.
 Зеркало (7) – служит для отражения световых лучей по направлению к объективу и через него внутрь микроскопа. Одна сторона зеркала плоская –
пользуются при дневном рассеянном свете, другая вогнутая – при искусственном освещении.
 Конденсор (6) – представляет собой двояковыпуклую линзу, конденсирующую пучки световых лучей для наибольшего освещения исследуемого предмета.
Общее увеличение микроскопа равняется произведению из увеличения объектива на увеличение окуляра. Так, например, комбинация иммерсионного объектива х90 с окуляром х10 дает увеличение объекта в 900 раз.
9

Приложение 3
ВИДЫ МИКРОСКОПИЧЕСКОГО ИССЛЕДОВАНИЯ
 Иммерсионная микроскопия наиболее часто применяется для изучения морфологии микроорганизмов с использованием иммерсионного масла.
 Исследование в тёмном поле применяют для микроорганизмов, которые плохо воспринимают окраску или не красятся совсем (лептоспироа,
вибрионы, спирохеты). Тёмное поле создаётся при помощи щелевого ультрамикроскопа, зетемнением в объективе или затемнением в конденсоре.
 В основе фазово-контрастной микроскопиилежит явление изменения фаз световой волны, благодаря чему усиливается контрастность изображения объекта. Прозрачные и малоконтрастные биологические объекты выглядят при том черно-серыми на светлом фоне (позитивный фазовый контраст) или светлыми на тёмном фоне (негативный контраст) иногда применяется для наблюдения за живыми объектами в раздавленной, висячей капле или специальных микроскопах (размножение, фагоцитоз, движение,
иммобилизация, взаимодействие бактерий и бактериофагов, влияние различных веществ).
 Люминесценция - свечение, сопровождающееся выделением тепла или возникающее под влиянием источника энергии (световые, рентгеновские лучи, электрический разряд). Способность объектов светиться самостоятельно называется фотолюминесценцией. Вторичная или непрямая люминесценция возникает после окраски объектов флюорохромами. В качестве флюорохрома часто используют акридин жёлтый, акридин оранжевый, аурамин.
Люминесцирующий микроскоп - это обычный биологический микроскоп,
оснащённый источником интенсивного ультрафиолетового света и светофильтрами. Люминесцентная микроскопия используется для идентификации возбудителей, В -, Т - лимфоцитов и их субпопуляций, для обнаружения иммунных комплексов в случаях аутоиммунных заболеваний.
 Электронный микроскоп даёт возможность рассматривать объекты, размеры которых лежат за пределами разрешающей способности оптического микроскопа (0,2 мкм). Используется для визуального изучения вирусов и структур клетки. В качестве источника освещения используется поток электронов с длиной волны в I0 5-6
раз меньше длины волны спектра видимого света. Эти микроскопы дают увеличение более чем в 200 000 раз и разрежающую способность до А (ангстрем равен 10 8
см).
10

Приложение 4
ТЕХНИКА ПРИГОТОВЛЕНИЯ МАЗКОВ
Чистое предметное стекло прокаливают в пламени спиртовки и кладут на стол обожжённой поверхностью кверху.
Пробирку с культурой микробов берут в левую руку в наклонном положении, придерживая её большим и указательным пальцем так, чтобы содержимое пробирки было хорошо видно. Материал для исследования берут прокаленной петлёй, которую держат в правой руке, как писчее перо, правой же рукой открывают пробку, зажимая её между ладонью и мизинцем. Вынув пробку,
края отверстия пробирки обжигают над пламенем спиртовки, вводят в пробирку петлю и набирают материал. После этого открытый конец пробирки вновь проводят через пламя спиртовки и закрывают пробкой, также проведённой через пламя. Взятый материал переносят на предметное стекло, после чего петлю прокаливают. Мазок высушивают на воздухе и подвергают фиксации. Для этого стекло мазком кверху проносят через пламя спиртовки 2-3 раза. Надёжность фиксации проверяют следующим образом: свободную от мазка поверхность стекла прикладывают к тыльной поверхности левой кисти. При правильной фиксации мазка стекло должно быть горячим, но не вызывать ощущения ожога.
11