Файл: 1. биопрепараты их применение при вирусных заболеваниях и принципы изготовления.docx
ВУЗ: Не указан
Категория: Не указан
Дисциплина: Не указана
Добавлен: 02.05.2024
Просмотров: 28
Скачиваний: 0
ВНИМАНИЕ! Если данный файл нарушает Ваши авторские права, то обязательно сообщите нам.
В результате перенесенного инфекционного заболевания или «скрытной» иммунизации, на практике широко используют преднамеренную иммунизацию антигенами для создания к ним невосприимчивости организма. С этой целью применяют вакцинацию, а также введение специфических иммуноглобулинов, сывороточных препаратов или иммунокомпетентных клеток. Приобретаемый при этом иммунитет называют поствакцинальным, и служит он для защиты от возбудителей инфекционных болезней, а также других чужеродных антигенов.
Приобретенный иммунитет может быть активным и пассивным. Активный иммунитет обусловлен активной реакцией, активным вовлечением в процесс иммунной системы при встрече с данным антигеном (например, поствакцинальный, постинфекционный иммунитет), а пассивный иммунитет формируется за счет введения в организм уже готовых иммунореагентов, способных обеспечить защиту от антигена. К таким иммунореагентам относятся антитела, т. е. специфические иммуноглобулины и иммунные сыворотки, а также иммунные лимфоциты. Иммуноглобулины широко используют для пассивной иммунизации, а также для специфического лечения при многих инфекциях (дифтерия, ботулизм, бешенство, корь и др.). Пассивный иммунитет у новорожденных детей создается иммуноглобулинами при плацентарной внутриутробной передаче антител от матери ребенку ииграет существенную роль в защите от многих детских инфекций в первые месяцы жизни ребенка.
31. Ингибиторы и их значение в диагностике вирусных инфекций
Ингибиторы – неспецифические вирусотропные вещества, подавляющие активность вирусов. Ингибиторы обладают избирательностью действия. В отношении одних вирусов они активны, в отношении других – нет. Вирусы могут адсорбироваться только на определенных клеточных рецепторах. Например, вирусы гриппа – на мукопротеидных. Для этих вирусов ингибиторами являются мукопротеиды, они есть в крови, слюне, моче, органах и тканях. Среди ингибиторов мукополисахаридной природы по устойчивости к температуре различают несколько групп.
-
α-ингибиторы. Термостабильные, выдерживают нагревание до 60 градусов, инактивируются при 75. Блокируют гемагглютинин вирусов. -
β-ингибиторы.Термолабильные, инактивируются при 60-62 градусах. Содержатся в нормальных сыворотках крови многих видов животных и человека. Также блокируют гемагглютинин вирусов и нейтрализуют инфекционные свойства некоторых вирусов (гриппа, парагриппа и др.) -
γ-ингибиторы, самые термостабильные, не разрушаются даже при 100 градусах. Высоко активны против вирусов гриппа, но не все типы. Их природа недостаточно изучена. Известно, что это белки, близкие к γ-глобулинам.
Механизм действия ингибиторов
Ингибиторы вступают в соединения с энзиматически активными участками вируса, т.е. с рецепторами вируса, блокируют их, препятствуют адсорбции вируса на чувствительные клетки. Блокированный ингибитором вирус не может проникнуть в неё. Механизм действия ингибиторов сходен с действием антител. Ингибиторы и антитела дополняют друг друга, но есть и принципиальные отличия:
-
Ингибиторы не обладают видовой специфичностью; -
Комплекс вирус + ингибитор не обладает способностью фиксировать комплемент; -
Вирус, блокированный ингибиторами, не теряет способности вступать во взаимодействие со специфическими антителами, антитела даже могут вытеснять вирус из комплекса вирус-ингибитор; -
При одновременном наличии в сыворотках крови ингибиторов и антител последние быстрее вступают в связь с вирусом, и эта связь более прочная;
32. Взятие и пересылка материала при бешенстве
Правила взятия и пересылки материала для вирусологического исследования.
Для вирусологических исследований желательно направлять пробы от животных в трех стадиях болезни:
-
от свежих трупов (кровь, кость, лимфоузел и пораженные органы); -
от убитых в агонии животных (кровь, кость, лимфоузлы и пораженные органы); -
от выздоравливающих животных (кровь).
Пробы необходимо брать асептически, не допуская их загрязнения, в стерильные флаконы. Каждую пробу необходимо брать в отдельный флакон. Все флаконы должны герметически закрываться пробками (обычно резиновыми), продезинфицированы снаружи, высушены и маркированы. Надписи необходимо делать простым карандашом с указанием вида и номера животного, названия органа и даты взятия материала. Лучшие условия— замораживание. Для пересылки образцы должны быть помещены в термосы со льдом или изотермические ящики, приспособленные для пересылки. Если образцы можно доставить в лабораторию в течение суток после отбора, то их не замораживают и не консервируют. Образцы, которые не могут быть доставлена в лабораторию в течение суток или в замороженном виде, необходимо консервировать глицерином. Он должен полностью покрывать кусочки взятых органов. Даже консервированные образцы желательно хранить в холодильнике. Успешная и точная диагностика зависит от быстроты доставки материалов в лабораторию.
Взятие проб крови от переболевших животных.
Пробы крови берут из яремной вены у крупного и мелкого рогатого скота, лошадей, из хвостовой артерии у свиней и из подкрыльцовой вены у птиц. Кровь можно брать из ушной вены. Перед взятием крови необходимо очистить и продезинфицировать кожу в месте укола или разреза. Каждую иглу или лезвие можно использовать только 1 раз.
Отбор проб костей.
От мелкого животного можно отрезать небольшой кусочек ребра или трубчатой кости, предварительно освободив их от мышечной и хрящевой тканей от крупных животных можно наскоблить ножом или скальпелем ткань красного мозга из любой трубчатой кости, лопатки, позвонков, грудных концов ребер. Целую кость, освобожденную от мышц, посылают в герметически заклеенном пластиковом мешке.
Отбор проб при заболеваниях с поражением эпителиальных покровов (везикулярные поражения).
При заболеваниях, которые вызывают поражение эпителиальных покровов, образование язв и абсцессов (ящур, везикулярный стоматит, оспа, бугорчатка и др.), от живых животных берут пробы крови и эпителий с участков поражения. От павших или убитых животных посылают образцы крови, лимфоузлов, кости и кусочков кожи на границе здоровых и пораженных участков. Правила отбора, консервирования, и пересылки образцов остаются такими же.
Взятие и подготовка материала для диагностического исследования на лейкоз. Для гематологического исследования кровь берут из яремной вены в пробирки с антикоагулянтом.Не разрешается брать кровь от животных за 15 дней до отела и 15 дней после него. Для серологического исследования кровь берут от животных в возрасте 6 месяцев и старше. В лабораторию в термосе со льдом направляют 5-6 мл сыворотки. Для гистологического исследования кусочки пораженных посылают в свежем виде в термосе со льдом или в 10%-ном растворе формалина.
33. Физические и химические методы исследования вирусов.
Физические методы:
*Ультрафильтрация. Ультрафильтры: керамические, асбестовые и мембранные. Принцип: определение размера вируса при фильтрации вируссодержащей суспензии через ряд мембранных фильтров с убывающими размерами.
*Ультрацентрифугирование. в пробирках с раствором сахарозы с разным градиентом плотности. Принцип: после центрифугирования собираются в той зоне столба, где плотность раствора равна их плотности.
*Вес и размер частиц может быть определен также методом диффузии.
*Электрофорез - количественное определение подвижности вирусных частиц в электрическом поле.
*Адсорбция. адсорбент смешивают с вируссодержащей сусупензией затем адсорбент удаляют из суспензии низкоскоростным центрифугированием или фильтрованием через специальные фильтры. Затем вирус элюируют с адсорбента.
Химические
*Осаждение солями. Вирусы осаждаются из водных растворов при определенной концентрации нейтральных солей. Для этого применяют сернокислые соли магния, натрия и аммония.
*Самоагрегация. При понижении ионной силы раствора сила отталкивания между вирусными частицами уменьшается и они склеиваются.
*Образование комплексов. При обработке вируссодержащей суспензии протаминсульфатом образуются комплексы с частицами размером более 50 ммк, которые выпадают в осадок. Частицы менее 50 ммк остаются в надосад очной жидкости.
Физико-химические
Хроматография - метод очистки и фракционирования вирусов. Различают адсорбционную, ионообменную и молекулярно-ситовую хроматографию.
34. Основные свойства вируса и его отличие от бактериальной клетки.
Основные свойства: 1. Ультрамикроскопические размеры; 2. Простое строение (состоят из белковой оболочки – капсида и НК); 3. У некоторых вирусов дополнительная внешняя оболочка — суперкапсид (из липидной мембраны зараженной клетки и вирусных белков); 4. Отсутствие собственных систем синтеза белка. Являются облигатными внутриклеточными паразитами.
Отличия: 1. Размеры вируса в нм, у бактерий в мкм; 2. Вирусы проходят через бактериальные фильтры; 3. Содержат 1 НК (ДНК или РНК); 4. Особый цикл репродукции (встраивается в НК инфицированной клетки); 5. Не имеет собственных белок-синтезирующих и энерго- систем; 6. Строго внутриклеточные паразиты; 7. Не культивируются на пит.средах (только в жив. Клетке: культура клеток, курин. Эмбрион, лаб. Ж-ые); 8. Обладают персистенцией (способность встраиваться в ДНК и находиться в дремлющем состоянии до снижения резистентности).
35. Строение вирусов.
Вирусы состоят из нуклеиновой кислоты (ДНК или РНК) и белков, образующих оболочку вокруг этой нуклеиновой кислоты, т.е. представляют собой нуклеопротеидный комплекс. В состав некоторых вирусов входят липиды и углеводы. Вирусы содержат всегда один тип нуклеиновой кислоты — либо ДНК, либо РНК. Причем каждая из нуклеиновых кислот может быть как одноцепочечной, так и двухцепочечной, как линейной, так и кольцевой.
Размеры вирусов — 10–300 нм. Форма вирусов: шаровидная, палочковидная, нитевидная, цилиндрическая и др.
Капсид — оболочка вируса, образована белковыми субъединицами, уложенными определенным образом. Капсид защищает нуклеиновую кислоту вируса от различных воздействий, обеспечивает осаждение вируса на поверхности клетки-хозяина. Суперкапсид характерен для сложноорганизованных вирусов (ВИЧ, вирусы гриппа, герпеса). Возникает во время выхода вируса из клетки-хозяина и представляет собой модифицированный участок ядерной или наружной цитоплазматической мембраны клетки-хозяина.
Если вирус находится внутри клетки-хозяина, то он существует в форме нуклеиновой кислоты. Если вирус находится вне клетки-хозяина, то он представляет собой нуклеопротеидный комплекс, и эта свободная форма существования называется вирионом. Вирусы обладают высокой специфичностью, т.е. они могут использовать для своей жизнедеятельности строго определенный круг хозяев.
Бактериофаг
Вирусы, паразитирующие в бактериальных клетках, называются бактериофагами. Бактериофаг состоит из головки, хвостика и хвостовых отростков, с помощью которых он осаждается на оболочке бактерий. В головке содержится ДНК или РНК. Фаг частично растворяет клеточную стенку и мембрану бактерии и за счет сократительной реакции хвостика «впрыскивает» свою нуклеиновую кислоту в ее клетку.
36. Строение куриного эмбриона и методы заражения.
Наиболее часто используют заражение:
На хорионаллонтоисную оболочку (ХАО); 11-13 день инкубации. Для заражения через естеств. возд. камеру на тупом конце яйца вырезают окно, пинцетом снимают подскорлупную оболочку, на обнажившийся участок наносят суспензию, окно заклеивают. Через искусственную: в скорлупе делают два отверстия: над центром воздушной камеры (для отсасывания из нее воздуха), а другое диаметром 0,2-0,5 см сбоку, со стороны зародыша. Через боковое отверстие на поверхность ХАО наносят инфекционную жидкость, отверстие закрывают. (оспа, чума крс и плотоядных, болезнь Ауески и др.).
В аллантоисную полость; 9-11 день, (вирусы гриппа, клещевого энцефалита, болезни Ауески). На стороне расположения эмбриона делают отверстие на скорлупе и подскорлупной оболочке, через которое вводят иглу шприца.
