Файл: Занятие 1 Клинический анализ крови и мочи Знать.ppt

Диагностические возможности лабораторных исследований,
Правила подготовки пациента, больного к лабораторным исследованиям,
Правила сбора, хранения и транспортировки биологического материала для выполнения лабораторных исследований,
Принципы методов лабораторных исследований,
Диагностическую значимость лабораторных методов исследования,
Возможные отклонения от нормы при некоторых физиологических и патологических процессах.

Уметь:

Выписывать направления пациенту для проведения лабораторного исследования,
Обеспечивать качественную подготовку пациента к исследованию биоматериала, его хранение и транспортировку материала для исследования в лаборатории,
Давать клиническую оценку результатов исследований биологического материала,
Выделять патологические изменения в составе и морфологии биологического материала при различной патологии.

Лабораторные методы исследования крови

Обеспечение высокого качества гематологических исследований возможно при стандартизации преаналитического и аналитического этапов работы.
Преаналитические ошибки 68,2%
Аналитические ошибки 13,3%

Постаналитические ошибки 18,5%

Факторы влияющие на показатели крови

физическая и эмоциональная нагрузка сезонные, климатические, метеорологические условия время суток прием пищи курение и т.д.
возраст пол активность пациента и положение его тела в момент взятия крови.
Показатели гемоглобина и гематокрита у больных в положении лежа снижены примерно на 6%. Выраженная диарея и рвота могут приводить к значительной дегидратации и гемоконцентрации.

Влияние суточных биоритмов на показатели крови

костный мозг наиболее активен утром селезенка и лимфоузлы около 17 – 20 часов максимум гемоглобина в крови наблюдается с 11 до 13 часов, а минимум с 16 до 18 часов;

эозинофилы наиболее низкие утром между 9 и 11 часами, пик эозинофилов наступает к 3 часам утра.
Исследования крови необходимо производить (кроме экстренных случаев) в одно и тоже время для получения сопоставимых результатов

Взятие и подготовка материала для исследования

Взятие крови
На точность и правильность результатов оказывают влияние техника взятия крови, используемые при этом инструменты (иглы, скарификаторы и др.), пробирки, в которые осуществляется взятие, а в последующем происходит хранение и транспортировка.
Стандартизация преаналитического этапа за счет использования стандартизированных коммерческих расходных материалов для взятия, хранения и транспортировки биопроб, стандартных реактивов и диагностических систем позволяют существенно повысить достоверность и точность исследования.

Кровь для общего клинического анализа берут

из вены из пальца мочки уха у новорожденных - из пятки
Исследование крови рекомендуется проводить утром натощак, до физической нагрузки и различных диагностических процедур, приема лекарственных препаратов, особенно вводимых парентерально.

Венозная кровь

Оптимальным способом аспирации крови являются вакутейнеры (вакуумные системы взятия крови):
содержат определенное строго дозированное количество антикоагулянта и обеспечивают стандартные условия аспирации всего объема крови, быстрое и качественное взятие крови пациента, сокращение времени взятия крови на 30 – 50%, кровь в пробирке не подвергается гемолизу, одной венопункции достаточно для отбора крови в несколько пробирок, отсутствует непосредственный контакт медицинской сестры или лаборанта с кровью больного, что обеспечивает профилактику вирусных инфекций, передающихся парентеральным путем.

Пробирки для получения сыворотки крови (иммунохимия, биохимия, бактериология, определение групп крови)

С активатором свертывания - красная крышка (черное или белое кольцо). Внутренние стенки пробирки покрыты сухим активатором свертывания (SiO - оксид кремния) для ускорения образования сгустка крови. Время свертывания 20-30 мин.
С активатором свертывания и разделительным олефиновым гелем - красная крышка и желтое кольцо. При центрифугировании гель формирует разделительный слой между сывороткой крови и сгустком.
С активатором свертывания и разделительными гранулами - красная крышка и красное кольцо. Гранулы из полистирола образуют разделительное кольцо между сывороткой и сгустком крови при центрифугировании.

С ЭДТА (этилендиаминтетрауксусная кислота) - фиолетовая крышка, черное кольцо. На внутренней стенке пробирки нанесена сухая ЭДТА-К2 или микрокапли раствора ЭДТА-К3 в концентрации 1,2-2,0 мг сухого реагента на 1 мл крови. ЭДТА предотвращает свертывание крови путем блокирования ионов кальция. Пробирки могут использоваться в автоматических геманализаторах без открывания крышки.
С ЭДТА-К2 и олефиновым гелем - фиолетовая крышка и желтое кольцо. Гель разделяет форменные элементы и сыворотку крови при центрифугировании. Пробирки используются для получения сыворотки при иммунохимическом определении термочувствительных аналитов (АКТГ, инсулин, С-пептид, паратгормон, гомоцистеин и др.)

Пробирки для получения плазмы крови с ЭДТА
(гематология, иммунохимия, генодиагностика)

Пробирки для получения плазмы крови с гепарином (биохимия, иммунохимия)

С гепарином - зеленая крышка, черное кольцо. На внутреннюю стенку пробирок нанесен сухой гепарин (Li-гепарин или Na-гепарин) в концентрации 12-30 МЕ на один мл крови. Гепарин препятствует активированию перехода протромбина в тромбин и останавливает образование фибрина из фибриногена.
С гепарином и олефиновым гелем - зеленая крышка, желтое кольцо.

Пробирки для получения плазмы крови с цитратом натрия (коагулология)

С цитратом натрия - голубая крышка, черное кольцо. Пластмассовые пробирки содержат буферный раствор цитрата натрия (3,2% или 3,8%) , используемого в качестве антикоагулянта для исследования коагуляции. Цитрат натрия, связывая ионы кальция, препятствует свертыванию крови.

Пробирки для получения плазмы крови для определения глюкозы

Пробирки с антикоагулянтом и стабилизатором глюкозы - серая крышка, черное кольцо. В качестве антикоагулянта используют ЭДТА К3, оксалат К или Li-гепарин. Ингибиторы гликолиза - флюорид натрия или монойодацетат стабилизируют уровень глюкозы в крови на период до 24 часов.

Пробирки для получения плазмы крови для определения СОЭ

Пробирки с 3,8% цитратом натрия -черная крышка и черная кольцо. Соотношение крови и реагента 4/1.

Венозная кровь

Взятие крови шприцом без антикоагулянта с последующим переливанием в пробирку недопустимо:

Капиллярная кровь

Для гематологических исследований капиллярную кровь рекомендуется брать в следующих случаях:
- при ожогах
- мелкие или труднодоступные вены

- выраженное ожирение
- склонность к венозному тромбозу
- у новорожденных

ЭДТА - предпочтительный антикоагулянт при подсчете форменных элементов крови с использованием автоматических гематологических анализаторов. Концентрация ЭДТА во взятой крови должна быть постоянной и составлять 1,5 - 2,2 мг/мл крови (например, для получения соотношения 1,5 мг/мл в пробирку, рассчитанную на 2 мл крови, наливают 0,04 мл 7,5% раствора К2ЭДТА или К3ЭДТА). Недостаток антикоагулянта приводит к микросвертыванию крови и образованию сгустка, избыток - является причиной роста осмотического давления крови и сморщиваня клеток. У некоторых пациентов может наблюдаться небольшая спонтанная агрегация тромбоцитов или реже, так называемая, ЭДТА-зависимая псевдотромбоцитопения (иммунного характера). Использование Nа2ЭДТА не рекомендуется вследствие его плохой растворимости в крови.
Гепарин - лучший антикоагулянт для определения осмотической резистентности эритроцитов и функциональных исследований лейкоцитов, включая ряд тестов с иммунологическими маркерами. Особенностью действия этого антикоагулянта является способность максимально предотвращать гемолиз. Мазки, приготовленные из гепаринизированной крови и окрашенные по Романовскому, имеют голубоватый фон.
Цитрат натрия - антикоагулянт выбора при исследованиях свертывающей системы крови и функции тромбоцитов.
Применение в качестве антикоагулянтов гепарина или цитрата натрия сопровождается изменениями в структуре клеток и поэтому не рекомендуется для исследования морфологии клеток крови, кроме того, гепарин не предотвращает агрегацию клеток, поэтому его нецелесообразно использовать при подсчете лейкоцитов и тромбоцитов.

Доставка, хранение и подготовка проб к исследованию

Исследование крови необходимо проводить либо непосредственно после взятия (исключается возможность спонтанной агрегации тромбоцитов), либо спустя 25 минут (время, необходимое для адаптации тромбоцитов к антикоагулянту) и не позднее 6 часов после взятия крови.