Файл: Занятие 1 Клинический анализ крови и мочи Знать.ppt

Гематокрит (НСТ, Ht - hematocrit, гематокритная величина) отражает долю объема крови, занимаемую эритроцитами; выражается в процентах или в виде индекса в системе СИ (л/л).
Наиболее распространен способ центрифугирования образца крови с добавлением антикоагулянта в стандартном капилляре с использованием гематокритных центрифуг и измерение высоты столбика эритроцитов. Наиболее удобны в использовании коммерческие гепаринизированные и негепаринизированные гематокритные капилляры (Deltalab) стандартов 75 мм, 70 мм и 30 мм.
В большинстве гематологических анализаторов предусмотрено определение гематокрита

Клинико-диагностическое значение определения гематокритной величины
Показатель гематокрита широко используют для суждения о степени анемии, при которой, как правило, отмечается его снижение, иногда до значительных цифр (20-25%). Уменьшение гематокритных величин при анемии происходит параллельно с уменьшением количества эритроцитов и их размеров.
Повышение гематокритной величины (55-65%) характерно для эритремии, менее резкое увеличение (50-55%) наблюдается при симптоматических эритроцитозах, сопутствующих врожденным порокам сердца, легочной недостаточности, некоторым гемоглобинопатиям.

Цветовой показатель отражает относительное содержание гемоглобина в эритроците. Вычисление цветового показателя производят по формуле:
3 х Нb
ЦП = RBC
Нb – концентрация гемоглобина в исследуемом образце крови
RBC – количество эритроцитов в исследуемом образце крови

Повышение среднего содержания гемоглобина в одном эритроците, а следовательно, и цветового показателя выше 1,05 (гиперхромия эритроцитов), обусловлено увеличением объема эритроцитов и имеет место при В12 -фолиеводефицитной анемии.

Гипохромия эритроцитов, то есть снижение содержания гемоглобина в эритроцитах (цветовой показатель ниже 0,85) является показателем недостаточной насыщенности эритроцитов гемоглобином и имеет место при железодефицитных и железорефрактерных анемиях.
Нормохромия (нормальный цветовой показатель) определяется у здоровых лиц, но может встречаться и при некоторых анемиях (нормохромные анемии - острая постгеморрагическая, гемолитическая, гипо - и апластическая, метапластическая).

Cреднее содержание Hb в одном эритроците (MCH- mean cell hemoglobin) вычисляют по формуле:
Нb (г/л)
MCH = ----------------------- число эритроцитов (млн/мкл)
Результат выражают в пикограммах (1 пикограмм = 10-12 г). Среднее содержание Нв в одном эритроците колеблется от 27 до 31 пг.

Средняя концентрация гемоглобина в эритроците (MCHС- mean cell hemoglobin concentration) вычисляется путем деления концентрации гемоглобина в г/100 мл на гематокрит и умножения на 100.
Гемоглобин (г/л)
MCHC = ----------------------- х 100 (г/мл)
Гематокрит (%)
MCHC отражает насыщение эритроцита гемоглобином и в норме составляет 30-38 г/мл. В отличие от MCH MCHC не зависит от клеточного объема и является чувствительным тестом при нарушениях процесса гемоглобинообразования.

Средний объем клетки (MCV- mean cell volume) - может быть подсчитан путем деления гематокрита (объема эритроцитов) на количество красных кровяных телец в единице объема. MCV= Hct/RBC, измеряется в фемтолитрах (фл). MCV является более объективным параметром, чем визуальная оценка диаметра эритроцитов. Нормальная величина данного показателя составляет 80-95 фл.

Причины повышения MCV:

Причины повышения MCV:
дефицит фолиевой кислоты
дефицит витамина В12
ретикулоцитоз (острая кровопотеря, гемолитическая анемия)
циррозы печени
хронический алкоголизм
к более редким причинам относятся злокачественные новообразования, микседема, апластическая анемия
Причины снижения MCV:
хронический дефицит железа
альфа - и бета-талассемия
анемия при хронических заболеваниях (уремия, ревматические болезни, тяжелые хронические инфекции и т.д.)
Причины повышения MCHC:
Сфероцитоз
Внутрисосудистый гемолиз (свободный Нв в плазме)
Высокие титры холодовых агглютининов
Причины снижения МСНС:
Хронический дефицит железа
Анемия при хронических заболеваниях

Рассчитать цп

Hb – 96г/л, RBC-4,32х1012/л (женщина)
Hb – 146г/л, RBC-4,8х1012/л (мужчина)
Hb – 82г/л, RBC-3,5х1012/л (женщина)
Hb – 135г/л, RBC-4,7х1012/л (мужчина)

Факторы, влияющие на правильность исследования лейкоцитов

криоглобулинемия
парапротеинемия
нормобласты
агрегаты тромбоцитов
нелизированные эритроциты
длительное хранение крови при комнатной температуре

Определение количества лейкоцитов в счетной камере.

Подсчет лейкоцитов под микроскопом проводят после лизирования эритроцитов в 100 больших квадратах счетной сетки и пересчитывают на 1 л крови, исходя из объема квадратов и разведения крови. Подсчет лейкоцитов должен быть произведен в течение 2-4 ч после взятия крови.

Основные источники ошибок при подсчете лейкоцитов в камере:

Неправильное соотношение объемов крови и уксусной кислоты, взятых в пробирку.
Неправильно подготовленный раствор уксусной кислоты (при концентрации большей, чем 5%, часть лейкоцитов может лизироваться, что приведет к занижению результата).
Длительное нахождение пробы при температуре выше 28°С, что может ускорить лизис лейкоцитов в образце и привести к занижению результата.
Неправильное заполнение камеры Горяева. Как и при подсчете эритроцитов, камеру необходимо оставлять на 1 минуту для оседания клеток.
Недостаточно хорошо отмытая после предыдущего определения камера Горяева. Оставшиеся в камере лейкоциты могут завышать результаты анализа.

Морфология базофилов, моноцитов, эозинофилов, лимфоцитов

Морфологическое исследование мазков крови

Техника приготовления мазка на предметном стекле

Используются чистые предметные обезжиренные стекла желательно толщиной 1 мм (фирма «Гем»).
Капля крови помещается в середине стекла в 1-2 см от одного из концов.
Шлифованное стекло, которым будет сделан мазок, ставят на предметное стекло под углом 30-45 градусов на 1-2 мм перед каплей и двигают его немного назад, чтобы стекло соприкоснулось с каплей крови и капля растеклась по углу между двумя стеклами.
Далее быстро проводят движение вперед по предметному шлифованным стеклом, которое должно быть уже предметного или специальным пластиковым шпателем (фирма "Гем", «А/О ЮНИМЕД»), позволяющим получить монослойный мазок практически на всем его протяжении.
Мазок должен иметь длину 3-4 см. Не следует сильно нажимать на стекло, так как при этом травмируются форменные элементы крови.
Мазки высушивают на воздухе и маркируют.

Окраска мазков крови

Наиболее часто применяют окраску по Романовском по Нохту по Паппенгейму-Крюкову
Существуют автоматические устройства для приготовления и окраски мазков, которые позволяют стандартизировать условия и повысить качество препаратов.

В настоящее время предлагается широкий спектр высококачественных красителей (фирма "Гем", НПФ "Абрис+"), удобные в применении и дающие хорошие результаты при окраске мазков. Можно использовать наборы для быстрого окрашивания мазков крови в течение 20-30 секунд (фирма "Гем").

Автоматическая фиксация и окраска мазков может быть осуществлена с помощью специальных устройств: "Гема-Тек" (США), "ПОМК-1" (Россия), в которые загружают нефиксированные мазки. Последующее автоматическое дозирование фиксатора-красителя и буферных растворов обеспечивает стандартную и равномерную окраску мазков.

Исследование мазка крови.

Окрашенный препарат крови должен сначала быть просмотрен с помощью иммерсионного объектива (90х) и окуляра 7х или 10х. Использование ЮОх увеличения позволяет оценить соответствующее клеточное распределение, ориентировочное количество лейкоцитов в мазке. При исследовании эритроцитов важно выявить отклонения в их размере, форме, степени насыщения и распределении гемоглобина, а также наличие включений. Затем оценивается число и морфология тромбоцитов, а также морфология и дифференциальный подсчет лейкоцитов.