Файл: Новые методы анализа аминокислот, пептидов и белков..pdf

Скачать файл (25,37Мб)

Заказать решение

ВУЗ: Не указан

Категория: Не указан

Дисциплина: Не указана

Добавлен: 14.10.2024

Просмотров: 113

Скачиваний: 0

ВНИМАНИЕ! Если данный файл нарушает Ваши авторские права, то обязательно сообщите нам.

454	ПРЕДМЕТНЫЙ УКАЗАТЕЛЬ

-------синтетические 297, 301, 302, 304

аппаратура 302—305, 318, 314— 318

на бумаге 336

время 312, 328—331

градиент плотности, рабочие рас

творы 311, 319, 320			326,
градиент pH	297, 302, 306,
328, 336
-------естественный 300, 336
-------искусственный 300, 336
-------линейный 302
диапазон pH 304, 309
зонное конвекционное 319
измерение pH	305, 308, 324
в изоточке	белков	агрегация
320		319—321,
-------определение 308,
335
-------осаждение 309, 312, 318
методика 306—309, 324—327
напряженность поля 312
область применения 314—320
определение 298, 299			302,
полиакриламидный гель 297,
321—328

преимущества метода 339 размывание образца 310

разрешение 300, 301, 310, 312, 319, 327, 335, 336, 339

слив колонки 308, 312 смеситель для формирования

градиента плотности 305, 307 спектры разделения 332 сущность метода 298, 299, 337

теория 299, 300

в тонком слое 269 электродные растворы 306, 325,

329

Электрофокусирование 320—339 в геле, аппаратура 322—324, 332

—время 328—330

—градиент pH 324, 328, 330

—измерение pH 324, 326

—методика 324—327

—нанесение образца 325, 327

—обнаружение белков 331

—окрашивание 326

—полимеризация 325, 327, 328

—препаративное разделение 335, 336

—применение 334

—разрезание геля 324

—разрешение зон 332, 335

—регистрация 327

—сопоставление зон 332, 333

— сочетание t электрофорезом в геле 337—339

----------- в градиенте плотности геля 338

—строение геля (химическое) 324

—удаление амфолитов-носите лей 326

—электролиты у катода и анода

325, 329

вградиенте плотности 297, 301— 320

-------аппаратура 302—305, 318

------- внесение образца 310

-------детектирование 313, 314

-------диапазон pH 309

-------композиция 309, 320

-------концентрация амфолитовносителей 309

-------методика 306—308

-------применение 314—320

-------разрешение 300, 301, 312, 319

------- температура 308 Электрофорез, см. также Диск-элек-

трофорез; Иммуноэлектрофорез; Микроэлектрофорез

Электрофорез в геле (см. также Диск-электрофорез; Электрофоку сирование в геле) 277—294

арагозы, содержащей антитела

274, 275

в градиенте плотности 338 сочетание с электрофокусирова

нием в геле 337

втонком слое, аномальная мигра ция 268—272

------- аппаратура 270

-------перенос образца 271, 272

-------сочетание с гель-фильтра цией 268—271

молекулярно-весовое распределе ние 419—423

полиакриламидного геля с на-

трийдодецилсульфатом 411, 414, 419—423

соотношение: электрофоретиче ская подвижность — молекуляр

ный вес 419, 420

сочетание с гель-фильтрацией

268—27.1, 274, 275

Эллмана реагент 366

Энцефалит, подострый склерозирую щий 271, 274

Эндоосмос 284, 301, 328, 336,

Энниатин 211 Энолаза 392

ПРЕДМЕТНЫЙ УКАЗАТЕЛЬ

455

Эритрокруорин 398, 399 Эсперин 224—225

Эс-традиол-связывающий р-глобулин

316

Этерификация аминокислот, пептидов в активном центре ферментов 369 диазометаном 106, 147, 148 диметилсульфитом 105 Катионообменные катализаторы

106

методика для аминокислот 114 спирты и кислые катализаторы

103, 104, 114, 128, 132, 135, 147

тионилхлорид 94 N-Этилмалеинимид 366, 379

Янга тест 174

Янтарный ангидрид 37?

СОДЕРЖАНИЕ

Предисловие	.......................................................................................................									б
Из предисловия к английскому изданию...................................................										8
Глава 1.	ХРОМАТОГРАФИЧЕСКИЙ							АНАЛИЗАМИНОКИС
	ЛОТ И ПЕПТИДОВ НА СФЕРИЧЕСКИХ СМОЛАХ
	И ЕГО ПРИМЕНЕНИЕ В БИОХИМИИ И МЕДИ
	ЦИНЕ . Дж .		В.	Бенсон мл.,				Дж. А. Патерсон . . . .		9
1.1.	Применение		метода..............................................................							9
1.1.1.	Применение в биохимии ....................................................									10
1.1.2.	Применение в медицине ....................................................									11
1.2.	Хроматографические системы ...........................................									18
1.2.1.	Одноколоночные				методы.....................................................					18
1.2.2.	Двухколоночные				методы.....................................................					19
1.2.3 ......................................	Смолы									20
1.2.4.	Хроматографические колонки ...........................................									22
1.2.5. .....................................................	Элюирующие ж идкости									23
1.2.6. .............................................................................	Д етекторы						колонки . . . ....................			26
1.2.7.	Контроль температуры						колонки . . . ....................			30
1.2.8. ........................................................................	Автоматизация									30
1.3. .....................................................	Методы	хроматографии								33
1.3.1. .....................................................................................	Методы									33
1.3.2. .....................................................	Катионообменные смолы									34
1.3.3. .....................................................	Анионообменные см о л ы									37
1.3.4. .................................................	Лигандная		хроматография							37
1.3.5.	Гидролиз пептидов в потоке жидкости . . . . . .									38
1.4. ...................	Факторы , влияющие на качество анализа									39
1.4.1. ..........................................................	Приготовление			пробы						39
1.4.2. ..............................................................	Заполнение колонки						буфера		'	40
1.4.3. ................... ....................	Влияние величины pH						буфера		'	41
1.4.4 .............................	Влияние концентрации						ионов натрия			43
1.4.5 .............................	Влияние концентрации цитрат - ионов									44
1.4.6 ..........................................................	Влияние	температуры								45
1.5. ....................................................	Расчет площадей					пиков				47
1.5.1. ...............................................................	Разрешение		п и к о в					п р о б ы		47
1.5.2 ...................................	Определение		концентрации					п р о б ы		48
1.6. ................................................	Рекомендуемые				методики					50
1.6.1. ..............................................................	Подготовка		п р о б ы					растворов		50
1.6.2. .............................	Приготовление			буферных				растворов		52
1.6.3. ......................................................	Нингидриновый				реагент					53
1.6.4. ...................	Методика	анализа				белковых гидролизатов				55
1.6.5.	Методика	анализа				физиологических			жидкостей . . .	61

1.6.6.Ускоренный одноколоночный метод анализа белковых

гидролизатов.........................

СОДЕРЖАНИЕ

457

1.6.7.Анализ отдельных аминокислот . .

1.6.8.

Соединения, содержащие селен . .

1.6.9.Методика разделения смесей пептидов Список литературы.............................

Глава 2.	ГАЗОВАЯ	ХРОМАТОГРАФИЯ АМИНОКИСЛОТ.
	Дж. Р. Коултер, К. С. Ханн . .......................................		85
2. 1.	Введение	..................................................................................	85
2.2.	Методы, имеющие исторический или исследователь
	ский интерес, а также методы специального применения		88
2 .2 . 1.	Окисление	нингидрином . ................................................	88
2.2.2.	Метиловые эфиры а-хлораминокислот.............................		89

2.2.3.Метиловые эфиры 2,4-динитрофениламинокислот . . . 89

Фенилтиогидантоины аминокислот................................. 902.2.4.

2.2.5.	Метиловые эфиры N.N-диметиламинокислот . . . .	90
2.2. 6.	а-Оксиаминокислоты..........................................................	91

2.2.7.Метиловые эфиры N-диэтилфосфатов аминокислот . . 91

Эфиры алкилиден- и алкиламинокислот........................ 922.2.8.

2.2.9.	Иодсодержащие аминокислоты...........................................			92
2.2.10.	Сульфо- и	селеноаминокислоты......................................		94
2 .2. 11.	Разделение	стереоизомеров................................................		96
2.2.12.	Методы единичного, ограниченного или недавно пред
	ложенного применения .........................................................			99
2.3.	Триметилсилиламинокислоты ..............................................			100
2.3.1.	Силилирование с помощью ТМХС, ГМДС и ТМС-ДЭА			100
2.3.2.	Силилирование силиламидами ...........................................			101
2.3.3.	ГХ анализ ТМС-аминокислот...........................................			102
2.4.	Общие методы: эфиры ацилированных аминокислот			103
2.4.1.	Этерификация карбоксильных групп.......................		• .	104

2.4.2.Получение эфиров аминокислот в виде свободных ос

	нований ..................................................................................	106
2.4.3.	Ацилирование амино- и других функциональных групп	107

2.4.4.Превращение аргинина в орнитин и гистидина в аспа

	рагиновую кислоту ...............................................................	112
2.4.5.	Устойчивость ацилированных аминокислот ...................	114
2.4.6.	Выбор эфиров ациламинокислоТ для Г Х ........................	115

2.4.7.Носители, жидкие фазы и способы разделения эфиров

ациламинокислот методом Г Х ...........................................

117

2.4.8.Количественное определение н-пропиловых эфиров аце-

тиламинокислот ...................................................................

127

2.4.9.ГХ-анализ белковых и пептидных Гидролизатов . . . 130

2.5.

2.6.

2.6.1.

2.6.2.

Заключение............................................................................	131
Используемые в тексте сокращения................... ....	. 133
Общие......................................................................................	133
Реагенты и группы ............................................... ....	133

2.6.3.Термины газовой хроматографий и Жидкие фазы . . 133

2.7.	Приложение ......................................		134
2.7.1.	Носители и жидкие фазы............................ .......................		134
2.7.2.	Эфиры ацилированных аминокислот.............................		135
2.7.3.	Гистидин ..................................................................................	. . . .	135
2.7.4.	Озонолиз гистидина ...........................................	. . . .	136
2.7.5.	Комбинированная ГХ-масс-спектрометрия....................	. . .	136
2.7.6.	ТМС-аминокислоты................................................	. . .	136
2.7.7.	Иодаминокислоты..................................................................		137
	Список литературы..............................................................		137

СОДЕРЖАНИЕ

ГАЗОВАЯ ХРОМАТОГРАФИЯ ПЕПТИДОВ. Б. Кольб

Введение .................................................................................						142
Получение летучих производных......................................						146
Защита аминогруппы.........................................................						147
Защита	карбоксильной груп пы ......................................					147
Защитные группы для третьей функциональной груп						148
пировки					>	148
Аппаратура	...................................................................				>	149
Колонки						149
Детекторы .............................................................................		данных				154
Публикация		данных				156
Относительное		время удерживания.................................				156
Система	индексов удерживания .......................................					159
Применение ГЖХ для анализа последовательности						165
аминокислот.....................................			.... .................................			165
Анализ последовательности с помощью комбинации
методов газовой хроматографии и масс-спектрометрии						168
Разделение	диастереомеров ..............................................					168
Дипептидный		т е с т ...............................................................				171
Трипептидный		т е с т ...............................................................				175
Приложение	к специальным задачам.............................					178
Анализ пептидов пиролитической газовой хроматогра						179
фией			•			179
Дополнение ............................. .......................................			•			182
Определение .................................данных удерживания						182
Вычисление .................................	времени пика		воздуха			183
Определение .............................	индексов удерживания					184
Список ..............................................................	литературы					186
МАСС-СПЕКТРОМЕТРИЯ В ХИМИИ ПЕПТИДОВ.
Б. Ц. Дас ........................................................., Э. Ледерер						189-
Введение........................................... ..................................			■			'189
Методы химической модификации пептидов перед их						189
Масс-спектрометрированием................................................						189
Полиаминоспирты..................................................................						190
Эфиры ...........................................	N - ацилолигопептидов					191
Основные пути фрагментации пептидов и их произ						192
водных ....................................................................................		пептидной	с в я з и			192
Фрагментация ......................................		пептидной	с в я з и			192
Фрагментация ................................................С—СО-связи						193
Фрагментация ...........................................боковых ц еп ей					в	194
Определение		аминокислотной последовательности			в	198
эфирах .................................	N - ацилпептидов		.	, ,	,	198
Природные ................................................	пептидолипиды					200
Синтетические ............................................- гликопептиды						208
Циклические ..........................................................		пептиды				208
Депсипептиды.......................................................................				, .	.	211
О, N-Перметилирование производных пептидов				, .	.	212
Замечания к методике перметилирования . . . . . .					.	216
Аминокислоты, определение которых осложнено . .					.	217
Обнаружение		природных	N-метиламинокислот . .		.	219
Масс-спектрометрическое определение последователь						220
ности производных перметилированных пептидов .					.	220
Пептидные ....................................................	антибиотики			, .	,	220
Олигопептиды, полученные деградацией белков				, .	,	225

Смотрите также файлы

Общее мерзлотоведение..pdf

Основы автоматизации для металлургов..pdf

Палий, А. И. Радиоэлектронная борьба.pdf

Полькин, С. И. Обогащение оловянных руд и россыпей.pdf

Радиоприемные устройства учебник..pdf

Файл: Новые методы анализа аминокислот, пептидов и белков..pdf

Смотрите также файлы

Информация

Списки файлов

Дополнительно