Файл: Методики постановки опытов и исследований по молочному хозяйству [сборник]..pdf

Конъюгированные жирные кислоты

Полиненасыщенные жирные кислоты молочного жира спо­ собны поглощать световую энергию в ультрафиолетовой обла­ сти спектра. Причем жирные кислоты с изолированными (иеконъюгпрованными) связями — линолевая, линоленовая и арахидоновая — поглощают свет в области спектра ниже 200 ммк, а их соответствующие изомеры с конъюгированными связями имеют полосы поглощения в участках спектра с боль­ шей длиной волны. Максимум поглощения в области 228'— 233 ммк соответствует непредельным кислотам с двумя двой­ ными связями (диеновым), в области 268—270 ммк — с тремя двойными связями (триеновым) и в области 298—322 ммк — кислотам с четырьмя двойными связями (тетраеновым). Эти полосы поглощения могут быть использованы для количест­ венного анализа смеси конъюгированных жирных кислот.

При определении конъюгированных кислот поступают сле­ дующим образом. В мерную колбочку на 50 мл отвешивают 0,16—0,18 г профильтрованного молочного жира и добавляют до метки n-гексан. Этот раствор жира является исходным для определения диеновых и триеновых кислот.

При определении диеновых кислот исходный раствор жира разбавляют гексаном в соотношении 1 :4—1 : 8 (чем выше со­

югированных тетраеновых кислот. Перед анализом содержи­ мое колбочек тщательно перемешивается.

61

Определение ведется на спектрофотометре СФД-2. Оптиче­ ская плотность растворов жира определяется для диеновых кислот при длине волны 233 ммк, для триеновых — при 262, 268 и 274 ммк, для тетраеновых — при 308, 316 и 322 ммк.

Удельный коэффициент погашения К вычисляют для каж­ дой длины волны по общему уравнению

водится. Оптическая плотность растворов жира составила

ция растворов жира в гексане составляет для диеновых кис­

лученные значения в формулы, находят процентное содержа­ ние кислот в жире.

62

0,0073+0,0055_ =Q[Q020; К;(!4 =2,6x0,0020=0,0050.

Са =0,84 X 0,5938 =0,4988 %,

С„,з =0,47 X0,0258=0,0121 %,

С„-л =0,45 ХО,0050=0,00225 %.

П р и б о р ы и р е а к т и в ы : спектрофотометр, аналитиче­ ские весы, мерные колбы на 25 и 50 мл с притертыми пробка­ ми, колбы Эрмленмеера на 100 мл с притертыми пробками, п-гексан.

Неконъюгированные жирные кислоты

Неконъюгированные кислоты способны поглощать свето­ вую энергию в области спектра ниже 200 ммк. Но эта область спектра (вакуумного ультрафиолета) недоступна в настоя­ щее время для широкого круга исследователей. Поэтому при количественном определении неконъюгированных кислот их лереводят в кислоты с сопряженными связями (определяемые при световой волне более 200 ммк путем изомеризации.

Изомеризацию проводят в течение 25 мин. при температу­ ре 180± 1° и концентрации КОН в этиленгликоле 6,5—6,6%. В колбу из жаростойкого стекла емкостью 250 мл и высотой 100 мм отмеривают 70 мл этиленгликоля и помещают ее в баню при 100°. Затем температуру бани повышают до 120°, колбу вынимают и осторожно вносят навеску КОН — 6,6 г, вновь помещают в баню, температуру которой поднимают до 190°, и выдерживают 10 мин. ЙВдальнейшем колбу вынимают, охлаждают холодной водой и проверяют концентрацию КОН.

63

Если концентрация КОН выше 6 ,6 %, то по расчету добав­

11г приготовленного раствора КОН, закрывают и помещают

в'баню .при 180°, выдерживая 20 мин. Затем в них опускают сосудики с навесками жира. Две колбы (из 6 ) остаются для контроля — в них опускаются пустые сосудики. Содержимое колб энергично встряхивают и помещают колбы в баню при 180°. Через 25 мин. штатив с колбочками вынимают и поме­ щают в холодную воду.

После охлаждения колбы вынимают из штатива, откры­ вают, удаляют конденсационную влагу, содержимое колб ко­ личественно переносят в колбочки емкостью 50 мл с притер­ тыми пробками (3—4 раза споласкивая метиловым спиртом) и доводят до метки. Колбы ставят в холодильник на ночь для осаждения веществ, выделяемых из стекла горячим щелочным раствором. На следующий день содержимое колб доводят до комнатной температуры и фильтруют через бумажные филь­ тры. Из исходного раствора приготавливают растворы нуж­ ной концентрации путем разведения метиловым спиртом (для диеновых кислот разведение примерно 1 : 2 0 , для триеновых— 1 : 7, для тетраеновых— 1:1, или исходный раствор).

Затем производят замеры на спектрофотометре при тех же длинах волн, что и в случае конъюгированных кислот, по сравнению с холостой пробой.

Высчитывается удельный коэффициент погашения для каж­ дой длины волны, обозначаемой как КЛ Из удельных коэф­ фициентов погашения К'л.-г, К'л.-з и К'лы вычитают коэффи­ циенты К л:2 ) К л : 3 И К л : 4 ПерВОНаЧЭЛЬНО ПРИСУТСТВУЮЩИХ

конъюгированных кислот.

Разница между удельным коэффициентом погашения жира при соответствующей длине волны nocyie изомеризации и до нее будет представлять коэффициент погашения неконъюгированных составляющих.

Вычисление коэффициента погашения проводится по сле­ дующим уравнениям:

64

Содержание неконъюгированных кислот (в %) рассчиты­

ления диеновых кислот применяется разведение 1 : 2 0 , триеновых— 1 :7 и тетраеновых — 1 : 1. Оптическая плотность рас­ творов жира составила при длине волны 233 ммк — 0,462 (диеновые кислоты), при длине волны 262, 268 и 274 ммк —

Подставляя .полученные значения в формулы, получаем про.- центное содержание кислот в жире.

К' «:4 =2;06Х (0,0559—.°'0377+ 0»0260 ) —0,0050=0,0444.

С' п:2 = 1,086 X2,5012—1,342 X0,44.20+ 0,4 X0,0444 = 2,1409%,

С' л:з = 1,98X0,4420—4,92X0,0444=0,6567%,

С '„:4 = 4,69+ 0,0444 = 0,2082%.